丹毒杆菌属

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第418页（2990字）

丹毒杆菌属在分类学上归属于那一科尚未确定。本属只有一个种为丹毒杆菌。本菌为革兰氏阳性短小的杆菌，在一定条件下菌体可联成长丝状。无运动性，不能形成荚膜和芽孢。发酵葡萄糖及其他碳水化合物时，可产酸不产气。

世界各养猪的国家均有猪丹毒发生，除感染猪外，还可感染火鸡、鸡、鸭、绵羊及幼水貂。外貌健康猪的扁桃体、鸡鸭的咽喉部、淡水鱼与海鱼的体表，丹毒杆菌的带菌率很高。此外，牛、驯鹿、羚羊、瘤牛、水獭、棕熊、狐狸、狼、野猪、海豚、海豹、海狮及野生的啮齿动物等可分离到丹毒杆菌。人类亦可感染。

猪感染后可引起败血症、皮肤疹块、关节炎或心瓣膜的增生。患急性败血型的病猪皮肤呈现潮红，继而发紫、死亡快，死亡率高。亚急性病猪的特征，在皮肤上出现紫红色方形或菱形疹块，病猪常可康复。慢性型常由前二种转变而来，症状为多发性增生性关节炎，或发生慢性心内膜炎，心瓣膜上有疣状赘生物。急性病死猪的主要病变是急性胃肠炎，全身淋巴结肿胀，肝、脾、肾肿大，呈深紫红色。

一、病原菌特性与实验诊断

(一)涂片检查 采取病猪的耳静脉血，死猪的心血、肝、脾及肾，慢性病猪的关节滑液制成涂片，用瑞特氏或革兰氏染色，镜检。本菌是一种纤细的小杆菌，菌体平直或微弯，大小约0．3～0．5×0．8～2．5μm，革兰氏染色阳性，在陈旧的培养物可变为阴性。在死猪的脏器抹片中，菌体常单独、成双或丛状排列，在血液涂片的白细胞内，可见到成丛的菌体。从慢性病猪的心瓣膜增生部及关节部分离的，或陈旧的培养物中，可见到菌体排列成长丝状，如霉菌的菌丝，但不分支。不形成荚膜和芽孢。

(二)分离培养 本菌为微需氧或兼性厌气，生长的适宜温度为35～37℃。将病料接种于pH7．6的肉汤中，生长不茂盛，微浑浊，如将培养物放在4℃冰箱中2～3天后，在试管底部见有少量乳白色沉淀，轻轻将试管旋转，沉淀物似絮状浮悬于液体中。如在肉汤中加入5%健康牛或马血清，则生长旺盛。接种于琼脂平板上生长较慢，培养24～48h，菌落直径约为0．8～1．0m m，透明，呈露滴状；培养4天以后少数菌落可发生变异，在菌落的外周出现不规则的边缘。在血液琼脂平板上生长的菌落较大，培养48h直径约为1～2mm，圆形，边缘整齐，稍带蓝色光泽；刚从死猪脏器中分离的菌落呈轻度α溶血。在血清琼脂平板上生长的菌落，圆形，呈蓝灰色，边缘完整，中部微凸，有灰棕色颗粒分散于菌落的中部。明胶穿刺培养2～3天后，沿穿刺线横向生长，呈“试管刷状”；明胶不液化。

(三)生化特性 本菌对碳水化合物的发酵作用，由于菌株的不同与是否加入血清等因素，所得结果常有差异。用1%蛋白胨水加5%马血清作为基础，再加各种糖类，接种被检菌株，培养48～96h观察结果。葡萄糖、果糖、乳糖、半乳糖可产酸不产气；木糖与蜜二糖可能产酸；蜜三糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、鼠李糖，山梨醇、甘露醇、肌醇、甘油、菊淀粉、淀粉及水杨苷常不产酸不产气。M．R．与V．P．为阴性。

紫乳无变化，不分解尿素，硝酸盐还原为阴性。可产生硫化氢，不产生靛基质。

过氧化氢酶阴性，血浆凝固酶阳性(用24h肉汤培养物0．5～1．0ml，加等量兔血浆，分装于小试管内混和，将试管放在37℃孵育过夜，次日取出观察，血浆出现凝固)。

(四)动物试验 小鼠与鸽最敏感，兔的易感性较差，豚鼠不易感，金黄色仓鼠大量腹腔注射可引起死亡，皮下接种很少出现死亡。

(五)血清学试验 急性与亚急性病例可用病猪的少量耳血或死猪的实质脏器，作生长凝集试验。培养基为马丁肉汤3．7ml，加抗猪丹毒高免血清0．1ml、卡那霉素4000Iu／0．1ml及万古霉素200μg／0．1ml，接种病料后37℃培养18h后取出，放在室温或4℃冰箱中1～2h，观察试管底部有无乳白色凝集，如有凝集反应，即证明病料中有猪丹毒杆菌。

慢性病例可从耳静脉或前腔静脉采血分离血清，作玻板或试管凝集试验，如为阳性反应，即为慢性猪丹毒。

玻板凝集试验：将制备的丹毒杆菌凝集抗原0．05ml滴在玻板上，再滴上被检血清0．05ml，用牙签将它们混匀；另取抗原0．05ml，不加血清，滴上生理盐水0．05ml作为对照，在2～3min内被检血清出现凝集反应，对照不凝集，即为阳性。

试管凝集试验：将被检血清稀释成1∶50、1∶100，分装在凝集管中，每管1ml，加入凝集抗原0．1ml，放在37℃2～4h取出，1∶50的试管如有凝集，即为阳性。

除上述检验方法外，荧光抗体技术与反向间接血球凝集试验也可检验丹毒杆菌，这2种方法的优点是可较迅速地得出结果，但需预先制备可靠的试剂，才能获得正确的结果。

(六)鉴别诊断 与丹毒杆菌相似的主要有李氏杆菌(Listeria)，两者的主要区别列于表18-4。

表18-4 李氏杆菌与丹毒杆菌比较

二、血清型鉴定

目前已确定的血清型有23个(1～23)，2个亚型及1个N型，其中1、2型是猪丹毒流行时常见的血清型(以前称为A、B型)。鉴定方法简述于下。

(一)分型血清的制备 健康新西兰白兔体重2～3kg，静脉接种不同血清型参考菌株的培养物(用福尔马林液灭活)，每隔4～5天接种一次，剂量从0．5～4ml，渐次增大，共注射5～6次，在最后一次注射后7天，从心脏采血，分离血清，加入硫柳汞(最后含量为0．01%)，放在-20℃冰箱内备用。

(二)抗原的制备 将待鉴定的菌株接种于含有5～10%马血清(或小牛血清)的马丁肉汤中，37℃培养24h，纯粹检验无杂菌，用福尔马林液灭活。3000r／min离心30min，弃去上清液，沉淀物加生理盐水，离心，洗涤2次。每30ml培养物的离心沉淀，加蒸馏水1ml，摇匀，放在高压灭菌器中，121℃1h，冷却后3000r／min离心30min，取上清液加入硫柳汞(含量为0．01%)，放在4℃冰箱备用。

(三)琼扩沉淀试验 用pH7．2的0．01mol／L磷酸缓冲液(含有0．01%硫柳汞)配成1．1%琼脂，制成平板。用打孔器在平板打孔，孔径为5mm，孔距约5mm。中心孔滴入抗原，外周孔分别滴入不同血清型的血清。将平板放在湿盘中，37℃孵育24h，取出观察，在抗原孔与血清孔之间出现沉淀线的，即为滴入血清相应的血清型。