可溶性糖的测定(蒽酮比色法测还原糖)

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《土壤农化分析手册》第632页（964字）

(一)适用范围 本比色法最适于测定含糖较少的样本，如植株茎叶中含糖量的测定，测糖溶液浓度范围是10－100ppm。因与标准系列葡萄糖液比较测定，结果也较准确可靠。

(二)试剂配制

1．葡萄糖系列标准溶液 称取1．0000g葡萄糖于1L容量瓶中，此溶液为含1000ppm葡萄糖母液。从中吸取1，2，4，6，8，10ml注入100ml容量瓶中，用水定容，即为含10、20、40、60、80、100ppm糖溶液的标准系列。

2．蒽酮溶液 称取0．100g蒽酮溶解于100ml84%的硫酸中(每100ml0．1%蒽酮溶液中的硫酸含量为比重1．84的浓H₂SO₄74ml)，此试剂须临用时配制。

3．80%酒精。

(三)测定步骤

1．可溶性糖的提取 称取细碎样品0．100g，加80%酒精10ml，管口松塞一小塞子，于80℃水浴中保温30min；取出离心，将上层清液移入一个50ml烧杯中。用此法对残渣重复提取两次，使可溶性糖提取完全。然后将上述酒精溶液置于80－85℃水浴上蒸发，直至剩下约3ml为止。然后用水定容25ml，作为糖的待测液。

2．测定 吸取待测糖液1－5ml，移入25ml容量瓶中，加水定容。再吸取2ml此稀释糖溶液(使糖浓度在20－80ppm之间)，放入具塞比色管中，然后沿瓶壁缓缓注入蒽酮试剂10ml，立即摇动半分钟，放入沸水浴中准确加热10min；取出放入冷水中迅速冷却；10min后显色稳定时进行光电比色，用1cm光径的比色杯，波长620nm读取吸收值。

标准曲线绘制：吸取系列标准葡萄糖溶液各2ml，分别放入6只具塞比色管中，按上述同样操作步骤显色后比色。以系列糖浓度为横座标，吸收值为纵座标，绘制标准曲线。

(四)结果计算