土壤中水溶性硼的测定(姜黄素法)

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《土壤农化分析手册》第661页（1797字）

(一)应用范围 一般实验室条件下，多用此姜黄素法测定土壤中水溶性硼。硼与姜黄素形成的玫瑰花青苷溶液在0．0014－0．06μg／ml硼浓度符合比尔定律(合20ml乙醇中含B0．02－1．2μg范围)，其吸收峰在555nm；而形成的红色姜黄素溶液则在0．005－0．2μg／ml(合20ml乙醇显色时含B0．1－4μg范围)，其吸收峰在580－600nm。故可根据含硼量，应用二个系列标准溶液比色测定。

(二)试剂配制

1．1NCaCl₂溶液。

2．饱和Ca(OH)₂溶液。

3．姜黄素草酸溶液 称取0．04g姜黄素和5．0g草酸溶于100ml95%乙醇中。贮存在棕色低硼玻璃瓶中，放在阴凉地方。姜黄素容易分解，每隔几天重配，放冰箱中有效期可延长3－4d。

4．系列标准硼溶液 将0．5716g硼酸溶于水，定容成1L，得浓度为100μgB／ml的第一贮备液。稀释10倍成10μgB／ml的第二贮备液。吸取此液1、2、3、4、5ml，各定容至50ml，配制成0．2、0．4、0．6、0．8及1．0μgB／ml的系列标准溶液，贮于5只塑料瓶中。

(三)测定步骤 称取20g通过2mm筛孔的风干土壤，放入150ml三角瓶中，加40ml水，连接回流冷凝器后煮沸5min，立即停火，使冷却水仍流动。稍冷后移下三角瓶，用表面皿加盖后放置便冷却。加2－4滴1NCaCl₂溶液以加速澄清(勿多加)。过滤或者离心分离得清液。

吸取1ml清液(含硼约0．2－5μg)，移入塑料、石英或瓷蒸发皿中，加4ml姜黄素溶液。在水浴上蒸发至干(温度55±3℃)，并继续烘焙1刻钟除去残存的水分。在蒸发与烘焙过程中硼显色成红色。加20ml 95%乙醇溶解，用干滤纸过滤到比色小瓶中，在555nm波长比色。也可以先用少许乙醇湿润残渣，加乙醇溶解后移入5ml离心管中，1500r·p·m离心10min。倾泌到25ml容量瓶中，定容后比色(假若透光度低于25－30%，说明含硼超过1．5μg，应改用580或600nm滤光片比色)。与此同时，吸取系列标准硼液各1ml，同样显色并比色。以得到的吸收值为纵座标，系列0．2、0．4、0．6、0．8及1．0μg／ml硼标准液为横座标，绘制标准曲线。

(四)结果计算

(五)注释

(1)若土壤中水溶性硼过少，使比色发生困难，可吸取较多的溶液，移入蒸发皿中，加少许Ca(OH)₂溶液使呈碱性反应，在水浴上蒸发至干，再加入少量(2或5ml)0．1N HCl溶解。然后吸取1ml进行比色。

(2)若硝酸盐超过20ppm，必须加Ca(OH)₂后蒸发至干如上述，再慢慢烧灼以破坏硝酸盐。用0．1N HCl溶解残渣，吸取1ml进行比色。Ca(OH)₂不应多加，也可以用10%BaCl₂溶液代替Ca(OH)₂，在提取前直接加0．5ml到三角瓶中。

(3)显色必须在酸性溶液中进行。若提取液或其浓缩液是微酸性的，加入姜黄素溶液后，由于有草酸故而保证所需酸度。

(4)蒸发显色的物理条件包括温度、容器的种类与体积、蒸发速度皆必须严格地保持一致，才能保证良好的再现性，否则再现性不良。

(5)实验最好不要在加入姜黄素后停顿，姜黄素和玫瑰花青苷络合物在室温放置时会发生变化，使测定结果不准确。

(6)硬质化学玻璃中常含有硼。所使用的玻璃器皿不应与试样溶液和试剂作长时间的接触。最好用塑料制品代替玻璃器皿。试剂中也常含有一定量的硼，应注意检验。