展望
出处:按学科分类—生物科学 农业出版社《植物细胞培养手册》第297页(2365字)
组织保存方法和技术近年来逐渐增多,获成功的实例也越来越多。但综观各种文献,可以看出,在实际过程方面还存在许多空白,希望对此能有更深入的了解。
有关冷却速度和低温保护剂的知识,为我们进行各种培养植物的特殊分类研究提供了可能性,可以预期这些实验将会带来巨大成就。我们对驯化和荷尔蒙作用了解还很零碎。为进一步的合理探索,还必须研究一些基本的生化过程,也许这一领域的研究能为更好地了解植物的生长和休眠,提供许多新的、有用的材料。存活率是一个重要的参数,但也不能过高地评价其价值。一个5-10%的存活率但解冻后能马上生长的材料,也许要比80%存活率而解冻后要经几周对数生长期才生长的要好。如果手头有1000个细胞,即使存活率为5%,对要获得贮存基因型的生长能力来说,已是足够的。在实际应用过程中,还有一个组织保存和种子保存的选择问题。由于天然贮存具有优越性,组织保存必须经人工处理才能贮存,因此,在大多数情况下,种子保存更为有利。不管何时,只要能长期保存,就应选择种子保存法。但在特殊情况下,当组织和细胞不能被种子取代时,组织保存法才为其保存提供了一种新的可能途径。
尽管目前LPS和LOS的研究已获得很大成功,但用于商业,尚有不少问题需解决。人们最关心的是,这种技术能否用于植物物种保存,这种长期的低氧分压对植物的影响如何?如果低氧分压能引起培养物基因型的改变,那么这种系统就不能应用。
LPS系统中需解决的一个问题,是培养基在低压下易失水,这已在烟草茎尖和番茄根尖培养中发现。培养基的失水对物种保存来说,会限制培养物的贮藏时间。但通过增高培养室的相对湿度或减少每小时的空气交换量,可能会使之有所好转。
LPS和LOS系统中需要解决的另一个问题,即不同的氧分压对于C3和C4植物影响不同,也许在低氧条件下贮藏C3植物要比贮藏C4植物更好。
为了确定LPS和LOS系统哪个更容易使用,更经济实惠,需对两者进行比较,LOS系统相对地说,花费较大,而在LPS系统中高效的真空泵并不昂贵,一旦系统建成后,LPS系统也较易操纵和控制。
实验和原理分析表明,氧分压低于50mmHg,会使机体和离体植物组织生长量都降低。同时试验表明,用LPS和LOS系统保存处理,不会产生物种类型的改变。据以上事实,说明将来用上述的技术来建立一个植物组织培养种质贮藏所是有可能的。
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