烟叶和土壤中残留量检测方法(方法一)
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第508页（1882字）
云南省农业科学院植物保护研究所 张雪燕
抑芽丹在盐酸作用下由糖甙形式被水解为游离态，SPE-C18柱净化，液相色谱法UV)测定。
1．主要仪器及设备
液相色谱仪 紫外检测器(UV)
超声波振荡器
植物样本粉碎机
全玻回流装置
2．主要试剂
甲醇(色谱纯)、磷酸、盐酸、双蒸水
1mg／mL标准储备液在100mL容量瓶中，称取抑芽丹标准品(99．7%)0．1000g，用双蒸水定容后，在超声波振荡器中震荡使其溶解。
标准溶液的配制 准确吸取0．5～8mL标准储备液，加入4mol／L盐酸溶液定容至100．0mL(1周内使用)。
SPE-C18柱 500mg／10mL
抑芽丹标准品
3．检测步骤
3．1 提取
称取干烟叶5．0g，鲜烟叶10．0g，土壤50．0g，分别装入500mL蒸馏瓶中，准确加入100．0mL4mol／L盐酸溶液，在沸水中回流1h。冷却至室温，用双层滤纸漏斗过滤。
3．2 净化
将SPE-C18柱依次用10mL甲醇、5mL双蒸水活化。取8mL左右上述滤液转入柱中自然下淋。弃去前4mL淋出液，收集后4mL洗脱液，待测。样本提取净化液在冰箱中储存，1个星期内稳定。
3．3 液相色谱法测定
检测器 UV
波长 220nm
色谱柱 4．6mm×250mm，C18柱
流动相 0．3%磷酸(每次检测完毕，需用甲醇冲洗色谱柱至平衡)
流速 0．8mL／min
进样体积 10L
保留时间 10．1min
4．结果计算
外标(峰面积)-标准曲线法定量
测定时所用标准溶液与待测样本中抑芽丹的浓度应尽量接近。
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 5×10－9g。
最低检测浓度 干烟叶10mg／kg，鲜烟叶5．0mg／kg，土壤1．0mg／kg。
回收率 鲜烟叶和干烟叶中添加抑芽丹20．4～203．6mg／kg时，平均回收率分别为98．0%～100．0%和95．3%～103．4%；土壤中添加抑芽丹4．07～40．7mg／kg时，平均回收率为78．8%～98．5%。见表3-23-1。
相对标准偏差 1．6%～10．9%，见表3-23-1．
表3-23-1 烟草和土壤中抑芽丹添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．烟草和土壤抑芽丹液相色谱测定谱图
见图3-23-1。
图3-23-1 烟草和土壤抑芽丹液相色谱测定谱图