茶多酚(维多酚)

出处:按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第51页(1813字)

一、茶多酚的鉴别

取本品配成1%的水溶液。滴加1滴香荚兰素盐酸溶液(1g香荚兰素溶于100mL浓盐酸中,用时现配),呈樱红色。

二、茶多酚的定量

1.原理

多酚类物质能与亚铁离子生成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。虽然各种儿茶素的呈色度不同,但茶多酚中的儿茶素组成范围大致相同,在此范围内,对吸光度的影响不大,故用一条标准曲线即可。此标准曲线与左旋顺式没食子儿茶素没食子酸酯的标准曲线一致,但因左旋顺式没食子儿茶素没食子酸酯不易得到,故用没食子酸乙酯。因10mg没食子酸乙酯的吸光度与15mg左旋顺式没食子儿茶素没食子酸酯的吸光度相等,故规定从没食子酸乙酯的标准曲线得到的量乘以1.5作为茶多酚的换算系数。

2.试剂与溶液

2.1 酒石酸铁溶液 称取硫酸亚铁1.0g,酒石酸钾钠5.0g,加水溶解并定容至1L,此液可稳定10天。

2.2 pH7.5的磷酸缓冲液

A液:1/15mol/L的Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠23.877g,加水溶解并稀释至1L。

B液:1/15mol/L的KH2PO4溶液:称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钾9.078g,加水溶解至1L。

取A液85mL和B液15mL混匀,即得pH7.5的缓冲液。

2.3 标准溶液的配制 精确称取没食子酸乙酯(100℃干燥1h)250mg,溶于100mL水中作为母液,分别吸取母液2mL、4mL、6mL、8mL、10mL于10mL容量瓶中,用水定容配制成100mL中含没食子酸乙酯50mg、100mg、150mg、200mg、250mg五种不同浓度的标准溶液。

3.仪器

分光光度计。

4.操作步骤

4.1 标准工作曲线的制作 准确吸取不同浓度的没食子酸乙酯标准溶液1mL和酒石酸铁试剂5mL,置于一系列25mL的容量瓶中,用pH7.5的缓冲液定容。用水代替没食子酸乙酯作为对照,用1cm的比色杯,在波长540nm处测定吸光度(A)。所测的吸光度与对应的没食子酸乙酯浓度绘制成标准工作曲线。

4.2 供试液的制备与测定方法。

4.2.1 制备:精确称取茶多酚浸膏试样200mg,茶多酚粉状试样100mg样品,置于100mL的烧杯中,加20~30mL90℃以上的沸水溶解,冷却,移入100mL容量瓶中,定容,过滤,弃去最初的滤液约20mL,所剩滤液为供试液。

4.2.2 测定:准确吸取供试液1mL,置25mL容量瓶中,加酒石酸铁溶液5mL,充分混匀,用pH7.5磷酸缓冲液定容。以试剂空白液作参比,于波长540nm处测定吸光度(A)。

5.分析结果的表述

根据标准工作曲线,求出相当于试样吸光度的没食子酸乙酯相应含量,按式(2-17)求出茶多酚含量:

式中 m——试样质量,mg

G——试样水分,%;浸膏样G=0

E——根据试样测得的吸光度(A),从标准曲线上查得的没食子酸乙酯相应含量,mg/100mL

1.5——茶多酚的换算系数

平行结果之差不得大于0.2%,结果精确至小数点后2位。

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