有机酸盐及铵盐利用试验
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第97页（5452字）
一、枸橼酸盐利用试验
(一)Simmons氏枸橼酸盐培养基
构橼酸钠 5g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．2g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 1g
氯化钠 5g
磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
1%溴麝香草酚蓝酒精溶液 8ml
除指示剂和琼脂外，加热溶解各成分，调pH为6．8～7．0，加入琼脂溶化后，再加入指示剂，分装试管，121℃20min灭菌，摆成斜面。亦可制成液体培养基。
(二)Christensen氏培养基
枸橼酸钠 5g
葡萄糖 0．2g
酵母浸膏 0．5g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g
半脱氨酸 0．1g
氯化钠 5g
琼脂 15g
0．2%酚红溶液 6ml
蒸馏水 1000ml
除指示剂和琼脂外，各成分加热溶解，调pH6．8，再加琼脂和指示剂，溶解后分装试管，115℃30min灭菌，摆成高层斜面。
(三)试验方法 将试验菌先划线后穿刺，37℃培养1～2天，阳性者斜面上有细菌生长，培养基由草绿色转为蓝色。如用Christensen培养基，阳性者培养基转为红色；阴性者培养基颜色不变。
(四)原理 某些细菌能利用枸橼酸盐作为唯一碳源，利用磷酸二氢铵作为氮源，能在此培养基上生长，并分解枸橼酸盐产生碳酸盐，使培养基变碱。
二、丙二酸钠利用试验
(一)培养基
酵母浸膏 1g
硫酸铵(NH4)2SO4 2g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 0．6g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 0．4g
氯化钠 2g
葡萄糖 0．25g
蒸馏水 1000ml
1%溴麝香草酚蓝溶液 2．5ml
丙二酸钠 3g
除指示剂外，各成分混合溶解，调pH为6．8，加入指示剂，分装试管，115℃30min灭菌。同时设一份不加丙二酸钠的作空白对照。
(二)试验方法 将试验菌分别接种丙二酸钠培养基和空白对照培养基，37℃培养1～2天。如测定培养基有细菌生长并变蓝色，表示试验菌可利用丙二酸盐，为阳性反应。如测定培养基未变色，空白对照培养基也不生长，表示该培养基成分不适于试验菌生长，应另选择合适的培养基进行测定。如测定培养基未变色，而空白对照培养基上能生长，则为阴性结果，表示试验菌不利用丙二酸盐。
三、醋酸钠利用试验
(一)培养基
氯化钠 5g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．2g
磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 1g
醋酸钠 2．5g
琼脂 15g
1%溴麝香草酚蓝溶液 8ml
蒸馏水 1000ml
除指示剂和琼脂外，溶解各成分，调pH为6．8～7．0，加入琼脂溶化后，再加指示剂，培养基呈草绿色，分装试管，121℃20min灭菌后摆成斜面。亦可制成液体培养基。
(二)试验方法 将试验菌接种子斜面培养基或液体培养基中，37℃培养1～2天，若培养基由草绿色转为蓝色者为阳性反应。
(三)原理 某些细菌可以利用铵盐作为唯一的氮源，同时利用醋酸盐作为唯一的碳源时，可在醋酸盐培养基上生长，并分解醋酸盐生成碳酸盐，使培养基变碱。
四、马尿酸钠水解试验
(一)培养基
胰蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
酵母膏 1g
马尿酸钠(Na-hippurate) 10g
葡萄糖 1g
磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5g
蒸馏水 1000ml
溶解各成分，调pH为7．2～7．4，分装试管，113℃20min灭菌。
(二)试剂 50%(V／V)H2SO4。
(三)试验方法 将试验菌接种于培养液中，适温培养一般3～5天(生长缓慢的细菌可到14天)。取1ml培养物和1．5ml 50%H2SO4混合，静止片刻。在酸性混合物中如有针状结晶出现，证明从马尿酸盐形成了安息香酸。
五、葡萄糖铵利用试验
(一)培养基
氯化钠 5g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．2g
磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 1g
葡萄糖 2g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
1%溴麝香草酚蓝溶液 10ml
除琼脂和指示剂外，各成分溶解后，调pH为6．8，加入琼脂溶化后，再加入指示剂，分装试管，113℃20min灭菌，放置斜面。
注意：容器使用前用清洁液浸泡过，再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做棉塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性。
(二)试验方法 用接种环沾取少量试验菌，在生理盐水管作极稀的菌悬液。将接种环灭菌，再挑取菌悬液少许接种，同时再以同法接种普通琼脂斜面一支作为对照。37℃培养24h。若试验管斜面上有正常大小菌落生长，培养基变黄者为阳性反应；阴性者无菌生长，但对照培养基上生长良好。
(三)原理 某些细菌可利用铵盐作为唯一的氮源，且不需要尼克酸和某些氨基酸作为生长因子时，可以在此培养基上生长，分解葡萄糖，使培养基变酸。
六、缩苹果酸盐利用试验
(一)培养基
酵母膏 1g
硫酸铵(NH4)2SO4 2g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 0．6g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 0．4g
氯化钠 2g
缩苹果酸钠 3g
蒸馏水 1000ml
0．2%溴麝香草酚蓝液 12．5ml
除指示剂，各成分加热溶解，调pH为6．8，分装试管，115℃20min灭菌。
(二)试验方法 将试验菌接种于上述培养基中，37℃培养24～48h，若培养基中指示剂由绿色变为深蓝色为阳性。