沙门氏菌属

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第250页（5587字）

沙门氏菌属是肠杆菌科中一大群抗原构造、生化特性相似的细菌，迄今已发现有2000多个血清型，常寄生于动物和人类肠道中，主要引起以肠道病变为主征的疾病，有的是人畜共患病或致食物中毒，有的能致母畜流产。只有不多的沙门氏菌对寄主有专嗜性，多数沙门氏菌为广嗜性，能在多种动物体内寄生、致病。例如马流产沙门氏菌只感染于马，而鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌等能感染人、家畜、家禽及其他多种动物。

一、形态特性

沙门氏菌为肠杆菌科中的一个属，较小，大小约1～3．5×0．5～0．8μm，一般无荚膜，除雏白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌等外，都具周身鞭毛能运动，多数有菌毛。

二、培养特性

最适生长温度为37℃，适宜的pH为6．8～7．8，在普通培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形或近似圆形、表面光滑、无色、半透明、边缘整齐的菌落，但雏白痢、鸡伤寒、猪伤寒、羊流产和甲型副伤寒等菌型在普通培养基上生长较贫瘠，菌落较小，菌落直径约0．5mm，而一般的沙门氏菌菌落直径为1．5mm左右。沙门氏菌在普通肉汤中呈均匀的浑浊生长。

检验沙门氏菌常用增菌培养基，因其中含有胆盐、煌绿或亚硒酸盐，能抑制革兰氏阳性菌及大肠杆菌的生长而让沙门氏菌繁殖，从增菌培养基或原被检材料划线到选择培养基或鉴别培养基上，不发酵乳糖的细菌(其中包括沙门氏菌)呈无色菌落，如有能发酵乳糖的细菌(其中主要是大肠杆菌)则生长呈有色菌落。

三、生化特性

沙门氏菌原列四个亚属，现已增至五个亚属，这五个亚属的区别，见表11-5。在检验工作中所遇到的沙门氏菌，几乎都是第一亚属的沙门氏菌，下表11-6《常见沙门氏菌的抗原和生化特性》中所列的沙门氏菌，也全是第一亚属的。

表11-5 沙门氏菌亚属的比较

符号说明：+——1～2天内91%以上菌株呈阳性；d——1～2天内11～90%的菌株呈阳性；-——1～2天内0～10%的菌株呈阳性；×——3～7天内呈迟缓反应或不规则反应。所有培养温度均为37℃。

四、抗原构造

沙门氏菌有O抗原(菌体抗原)、H抗原(鞭毛抗原)、Vi抗原(一种表面抗原，称毒力抗原)。O抗原能耐100℃数小时且不被酒精或0．1%石炭酸所破坏；H抗原不耐热，60～70℃15min即被破坏，也不耐受酒精；Vi抗原不耐热也不稳定，热至60℃或以石炭酸处理，即被破坏，人工培养传代，也可消失。Vi表面抗原的存在，可阻碍O抗原与相应抗体的凝集，如将菌体加热破坏其中的Vi抗原，则O抗原暴露能与相应抗体凝集。常见的沙门氏菌抗原构造见表11-6。

表11-6 常见沙门氏菌的抗原结构与生化特性表

符号说明：［ ］——方括符内的抗原，可能有，也可能没有。

+——24小时阳性；一——30天仍为阴性；V——有不同的生物型(即有的生物型是阳性，有的生物型是阴性或迟缓反应)；

×——迟缓阳性或反应不规则；(×)——大多数为阴性；-，+——24h后48h内为阳性。

复红甘油的反应：+——紫色；++--紫丁香色。-——阴性，即观察8天仍与对照管的颜色一样。

五、沙门氏菌的检验

若检样含菌量少而其他细菌(如大肠杆菌、肠球菌等)多，特别是检样为粪便或腐败的食物，可先将样品接种于增菌培养基(四硫磺酸钠煌绿培养基、亚硒酸盐胱氨酸培养基)，37℃培养16～18h后，再转到选择或鉴别培养基上划线分离，也可将被检样品直接接种到选择培养基或鉴别培养基上划线，培养于37℃下24h，从上选菌落接种到三糖铁琼脂上(斜面划线并作底部穿刺)。

选择培养基是能抑制革兰氏阳性菌及大肠杆菌的培养基。其中的SS琼脂，沙门氏菌的菌落灰色，中心带黑色；去氧胆酸盐琼脂，沙门氏菌的菌落蓝绿色，中心为棕色或黑色；亚硫酸铋琼脂，沙门氏菌的菌落为黑色；HE琼脂，沙门氏菌菌落为蓝绿色或蓝色，中心或呈黑色。鉴别培养基能抑制革兰氏阳性菌生长，但肠杆菌科的细菌通常都能生长，大肠杆菌及其他发酵乳糖的细菌生长出有色菌落，而沙门氏菌及其他不发酵乳糖的细菌，生长出无色(与大肠杆菌比)菌落，这类培养基很多，常用的有麦康克琼脂、远藤氏琼脂、伊红美蓝琼脂等。

三糖铁琼脂是很常用的培养基，发酵乳糖或蔗糖的细菌，上(斜面)下(底部)均变黄；只发酵葡萄糖的细菌上红下黄；分解上三种糖之一(或之二或之三)产气的，底有气泡；产硫化氢的，培养基有黑色。大肠杆菌上下黄产气而沙门氏菌上红下黄有黑色可能产气。

三糖铁上发现有沙门氏菌可能，将被检菌株继续做一些项目的检查。常见的沙门氏菌应是M．R．+，V．P．-，利用柠檬酸盐，吲哚-，尿素酶-，葡萄糖产气(鸡沙门氏菌、伤寒沙门氏菌例外)，甘露醇+(猪伤寒沙门氏菌例外)，麦芽糖+(鸡沙门氏菌例外)，能运动(鸡沙门氏菌、雏白痢沙门氏菌例外)。根据检查结果，染色又是革兰氏阴性杆菌，可做其抗原测定。有经验的工作人员，往往从三糖铁上就取菌苔试做沙门氏菌的抗原测定。

进行抗原测定时，采用沙门氏菌的A-E或A-F的多价血清(许多生药厂均有此产品)与被检菌(三糖铁或营养琼脂斜面上的菌苔)进行玻板凝集试验，同时以生理盐水代血清作对照。若生化反应比较典型，而与多价O血清又不发生凝集时，应考虑被检菌是否含表面抗原(Vi抗原)，故应以已知的Vi血清与被检菌作Vi凝集试验，若凝集，除证明该菌有Vi抗原外，就应将Vi抗原破坏，以测其O抗原。也就是将菌苔用无菌生理盐水洗下，制成浓厚的细菌悬液，加热至100℃维持30分钟以破坏Vi抗原而使O抗原暴露，再以多价O血清进行凝集试验，若凝集，再用单因子O血清定其O抗原结构。作H试验时，先制备H抗原。用运动力活泼的(初分离的菌株如运动力不活泼时，可用半固体传数代)18h营养琼脂斜面培养物，以含福尔马林0．3%的生理盐水洗下制成浮悬液即成，或以其18h肉汤培养物离心沉淀后加上述福尔马林盐水浮悬亦可。将含H抗原的福尔马林菌液，用已知的H因子血清也作玻片凝集反应，以定其H抗原结构。

检查沙门氏菌还可利用荧光抗体。将可疑沙门氏菌的被检样品(肉品、粪便、蛋品等)或经过增菌的培养物(不需要是纯培养)制成涂片，以沙门氏菌多价荧光抗体染色，用荧光显微镜检查。此法可快速得出初步结果，但得不出是那种沙门氏菌的结果，具体染色法见本书荧光抗体或参阅所购得的沙门氏菌多价荧光抗体使用说明。

综上所述，沙门氏菌的检验可概示如下。

1．猪沙门氏菌的主要病原 猪沙门氏菌病又称仔猪副伤寒，其主要病原有猪霍乱沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌孔成道夫(Kunzendorf)变型以及猪伤寒沙门氏菌、猪伤寒沙氏菌Voldagsen变型、鼠伤寒沙门氏菌、德尔俾沙门氏菌、肠炎沙门氏菌等。

猪沙门氏菌病以1～4月龄仔猪发生较多，6月龄以上的猪常为其他疾病(尤其是猪瘟)的继发感染。猪群中若存在沙门氏菌潜伏性感染，仔猪生长发育不良，偶尔下痢，有的猪只病情发展到一定阶段，恶化，死亡。

实验诊断包括以下内容。

(1)样品采集 最好将死亡12h内的尸体送检。若有困难，以无菌操作采心血、脾、肝、淋巴结、管状骨等，置30%甘油盐水中送实验室。

(2)病原菌的分离鉴定 按沙门氏菌分离鉴定常规法进行。对猪沙门氏菌病病原的诊断，应结合流行病学和病理解剖、病毒学资料，注意是否为猪瘟病毒混合感染。

2．牛沙门氏菌病的主要病原 多种沙门氏菌可引起牛沙门氏菌病，主要有都伯林沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、牛病沙门氏菌、牛流产沙门氏菌、肠炎沙门氏菌和纽波特沙门氏菌等。以前二者为主要、常见，它们引起牛腹泻，特别是幼畜，能致孕牛流产，极少数能致败血病。

实验诊断内容如下。

(1)样品采集 最好将新鲜的病死犊牛或流产胎儿及时送检，或采取粪便(生前即可采送)、胎儿肝胃、死畜的肠道及其淋巴结、脾、肝、胆囊、肾、肺、血液、管状骨等送检。

(2)病原分离鉴定 按常规法进行。

3．羊沙门氏菌的主要病原 主要病原有羊流产沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、牛病沙门氏菌或都柏林沙门氏菌。断乳羔较新生羔易感，主要病征为出血性下痢，孕畜感染可致流产。取材送检与牛的相同。

4．禽沙门氏菌病的主要病原 由雏白痢沙门氏菌引起的病称为雏鸡白痢，由鸡沙门氏菌引起的禽病称禽伤寒，由其他沙门氏菌所引起的称禽副伤寒。禽副伤寒的病原种类很多，其中以鼠伤寒沙门氏菌最为常见，其次为德尔俾沙门氏菌(Sal．derby)、海德堡沙门氏菌(Sal．heidelberg)、纽波特沙门氏菌(Sal．newport)及鸭沙门氏菌(Sal．anatum)等。幼禽对副伤寒最易感，如出雏后10天的幼鸭发病率最高，其次为一个月龄的幼鸭，4个月以上的鸭群很少发生。成年禽以慢性带菌者最多。鸡副伤寒常发生于4～5天和10～12天的幼雏。

禽沙门氏菌病的病原分离、鉴定，按沙门氏菌分离鉴定常规法进行。

以下重点介绍雏白痢沙门氏菌。

该菌可引起雏鸡白痢，并可呈急性败血症经过；成年母鸡的产蛋量、蛋的孵化率降低。

(1)样品采集 将数只病鸡或新鲜尸体送检。或取心血、肝、胆汁、脾、骨髓、卵巢等接种培养，雏鸡还可接种未吸收的卵黄，母鸡还可接种腹腔内存在(如有的话)的变形卵。

(2)病原分离鉴定 按沙门氏菌分离鉴定的常规法进行。

(3)血清学检验

(1)全血平板凝集试验 适用于鸡群检疫。抗原——鸡白痢全血凝集反应抗原——是用雏白痢沙门氏菌和鸡沙门氏菌培养物的混悬液，加入甲醛溶液杀菌后，用柠檬酸钠生理盐水稀释而成，成都兽药厂有此商品。

试验方法为先将抗原充分振荡均匀，吸取一滴(约0．05ml)滴于玻片上，随即采血一滴滴在抗原处，搅拌均匀。抗原和血滴混合后，于2min内出现明显的颗粒凝集或块状凝集，判为阳性反应；在2min内不出现凝集，或仅现微细的颗粒，或在边缘处由于临干前形成有网絮状物等，均判为阴性；反应结果介于两者之间，不易判定为阳性或阴性的，判为可疑。本反应在10℃以上室温中进行。

(2)琼脂扩散试验 用全血或血清均可，抗原用可溶性抗原，本试验可区别特异性反应，由于无商品可溶性抗原，基层应用受到影响。

此外，还有试管凝管反应、血清平板凝集试验，方法见免疫学方法的相应部分，工作时需先分离血清。

甘油复红(即甘油一品红)肉汤的做法如下。

溶液1(肉膏10g，蛋白胨20g，普通水100ml，调节pH到8) 100ml

溶液2［饱和碱性复红酒精(即10%)溶液］ 0．2ml

溶液3(新配的10%无水亚硫酸钠溶液) 1．66ml

甘油 1ml

将上四物按量混合，分装试管，121℃灭菌12min。

将被检菌从固体培养基上移植到甘油复红肉汤中，培养于37℃，并以未接种细菌的培养基同时培养作对照，观察8天。阳性反应者为紫色，弱阳性者紫红色，阴性者与对照同(即为黄色或黄中微带粉红色)。此反应有助于沙门氏菌鉴别，见表11-6。