嗜皮菌属
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第443页（3515字）
嗜皮菌属属于放线菌目、嗜皮菌科。本属只有一个种，即刚果嗜皮菌(D．congolensis)。此菌能产生游动孢子(zoospore)。游动孢子或菌丝经接触、吸血昆虫或其他机械传播而传染到健康动物，引起皮炎为特点的嗜皮菌病。此病在国外还有别的名称，如皮肤放线菌病、皮肤链丝菌病、霉菌性皮炎、团毛病、草莓状腐蹄病等。
嗜皮菌病分布于非洲、亚洲、美洲、大洋洲、欧洲，见于牛、绵羊、山羊、马、驴、猪、羚羊、鹿、长颈鹿、斑马、北美地松鼠、绵尾兔等，并感染于人。我国已在某些地区发现，见于牦牛、水牛、山羊和马。
疾病表现为患部皮肤发炎，有豌豆大至蚕豆大结节。结节表面粗糙，常与皮毛粘在一起，毛长者成团(如绵羊)，毛短者似油漆刷子(如牛)，无毛处(如眼、耳、口、鼻周围)或脱毛处则结节裸露。后来，结节形成痂块，痂块继而脱落，轻症者可自愈。如患部面积大或有其他细菌继发感染，则病情较严重，患畜消瘦、萎靡，个别死亡。此病死亡率极低，但生长、产乳、产肉、产毛的经济上损失，相当重大。
一、病原菌特性与实验诊断
(一)涂片检查 采湿痂连同渗出液，用力擦在玻片上做成涂片；干痂可加少许生理盐水研磨后，做成涂片。湿痂比干痂好，以骆氏美蓝或姬姆萨或瑞特氏染色较好。革兰氏染色虽易染上且表现为革兰氏阳性，但因着色深，加上组织成分和易有染料沉淀，反不如骆氏美蓝等法清晰。
嗜皮菌的菌丝分支，直径2～5μm，顶端的菌丝断裂，由于向纵横两个方面分裂成球状，故在涂片中可见成堆或散在的“四联球菌”状或“八联球菌”状的孢子，由于有周身鞭毛，故称游动孢子，用悬滴标本检查，可见孢子能运动。孢子直径为0．5～1．0μm。
涂片可见的要点是分支的菌丝，分支部位以上的菌丝较细，菌丝顶端或其附近有像八联球菌状的孢子，如作鉴别染色是革兰氏阳性、非抗酸性。
(二)分离培养 将湿痂或渗出液接种于鲜血琼脂平板，置于适宜的温度(37℃)培养。此菌可生长的温度为25～40℃，pH以7．2～7．5为宜，需氧兼行厌氧，但需氧下的生长较厌氧下为丰盛。干痂块可加少许生理盐水或肉汤研磨成稀糊状后再接种。此菌在37℃下24h，可长成0．5mm大的灰白而隆起的菌落，或圆或方，或边缘略不整齐，粘稠或粗糙而坚硬，有的菌株所产生的菌落与培养基粘连较紧。2～5日后，菌落可达2mm，现出桔橙色，菌落密集处所现出的桔橙色更为明显，但有的菌株的菌落一直是灰白色，菌落有明显的β型溶血。
有的被检材料，直接分离不易成功，可先接种到同种动物或兔，待动物或兔感染后，取其丘疹或结节，接种到鲜血平板，则较易分得。
此菌在营养琼脂上生长不良或不生长，在培养真菌的培养基，如沙氏(Sabouroud)、查氏(Czapek)培养基上不生长。在吕氏血清上生长良好，5天后多液化，有40%菌株三周仍不液化。
在普通肉汤或厌气肝汤中，37℃48h，底部有絮状或微粒状沉淀，液体清朗，表面或有白色菌环或菌膜，有时管壁上附有细菌生长的小颗粒或团块，易沉于底。
刚生长的培养物，可见伸长的菌丝，直径约0．5～1．0μm，有分支，角度近直角，菌丝可有中隔，但顶尖部无中隔，顶部或附近可见八联球菌状的游动孢子，也有四联球菌状的及少数双球状或单球状的，还有时可见游动孢子发芽开始长成菌丝。悬滴或压滴，可见游动孢子有运动力，单个的更明显。较久的培养物可能只见球状体或多数为球状体，菌丝或球状孢子染色为革兰氏阳性，非抗酸性。
(三)生化特性
1．接触酶 不用鲜血琼脂上的培养物而用吕氏(凝固)血清上的培养物测定，或用脑心浸液琼脂的生长物一铂耳，浮悬于一滴30%的H2O2水中，作点滴试验，应为阳性。
2．生化反应 葡萄糖、果糖产酸不产气，多在48h出现，阳性反应持续表现到两周以上；半乳糖48h产酸，两周时培养基又变碱；麦芽糖48h无反应，1～2周时大多数菌株能使之产酸；对乳糖、蔗糖、木糖、卫茅醇、甘露醇、山梨醇、杨苷无反应，M．R．或V．P．反应均阴性，不分解淀粉。
3．对含氮物质 紫乳(每100ml脱脂乳中加入1．6%溴甲酚紫酒精溶液1ml，121℃15min灭菌)在1～3周内被胨化。被测的25个菌株，根据国外资料，只有一个从绵羊草莓状腐蹄病分得的菌株，到3周后仍不现胨化；根据国内资料，从国内分得的7个菌株，均于一周时开始胨化。
(1)明胶 国内的七株均于9～11天开始液化，而国外的资料则称，多数菌株在一周内液化，但少数在3周时仍不液化。
(2)酪蛋白分解试验 将脱脂牛奶与2%琼脂分别高压灭菌后，趁热(约47℃)等量混和，倾注平皿，冷凝后接种被检菌，培养，检查。在细菌生长处附近透明者表示酪蛋白被分解。国内菌株均于48h后现阳性反应。国外资料，25个菌株，除1株羊源1株马源者外，也均于1周内分解酪蛋白。
(3)尿素分解试验 将脑心浸液汤琼脂上生长的嗜皮菌，接种于供嗜皮菌用的尿素分解培养基(参阅培养基部分)，培养于36℃(±1)，24h现阳性反应。
(4)酪氨酸或黄嘌呤分解试验 所用基础培养基为脑心浸液或脑心浸琼脂，加入酪氨酸达0．5%或黄嘌呤达0．4%，高压灭菌。培养基制好后应在肉汤或琼脂中可见酪氨酸或黄嘌呤的结晶(如不见结晶应微增其浓度)，接种细菌，培养，观察。嗜皮菌在3周内不分解酪氨酸或黄嘌呤。细菌如能分解，则结晶应消失，以含琼脂的培养基操作，更为明显，有细菌生长处无结晶，无细菌生长处结晶仍存在。要逐日观察，因为时间一长，无细菌生长处的结晶也可能消失。
(5)硝酸盐还原试验 阴性。
(四)动物试验 小白鼠、兔、豚鼠、绵羊、山羊等均易感，但以兔、豚鼠或羊较宜。将痂块磨碎液或分得菌株擦于剃毛皮肤处，7日后有痂块形成，与天然病例相似，可助诊断。如前(分离培养段)所述，当原材料有其他细菌污染，分离困难时，通过动物更易获得纯培养。
(五)荧光抗体诊断 近年来，应用荧光抗体诊断此病，获得成功。
二、鉴别诊断
本病易误认为皮霉菌病，病原鉴别，如表所示。
表18-8 两种病原鉴别表
(廖延雄编)
脑心浸液汤(brain heart infusion brorh)的制法是取小牛脑浸液(小牛脑100g加水200ml浸泡越夜，煮沸半小时，过滤清朗)200ml，牛心浸液(同上，惟以牛心代小牛脑)200ml，胰蛋白胨10g，葡萄糖2g，氯化钠5g，双盐基磷酸钠2．5g，琼脂15g，蒸馏水1000ml。滴定pH至7．6，分装，121℃15min灭菌。使用时最终pH应为7．4。
此培养基除用于刚果嗜皮菌外，还可用于牛放线菌、荚膜组织孢浆菌、嗜血杆菌等的培养生长用。
尿素分解培养基(嗜皮菌用)制法是用0．5%NaCl、0．2%KH2PO4、0．1%蛋白胨、0．1%葡萄糖、2%琼脂，每100ml培养基中加有0．2%酚红，高压灭菌，pH应为6．9，趁热加入十分之一的过滤灭菌的20%尿素水溶液，无菌分装备用。
用时取嗜皮菌的脑心浸液汤琼脂培养物接种，培养于36℃(±1)观察，至2周仍为阴性者弃之。嗜皮菌于24h内能分解尿素。