血吸附和血吸附抑制试验

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第569页（923字）

细胞培养被某些病毒感染后，不论有无细胞病变，能吸附一些动物的红细胞。能凝集红细胞的病毒，一般具有血吸附的作用。然而也有例外，如部分肠道病毒有血凝作用但无血吸附现象；相反非洲猪瘟病毒虽不显示血凝活性，但却有血吸附作用。

一、血吸附试验

简便而迅速，敏感性良好，但必须注意细胞培养不能污染具有血凝活性的病毒，因此最好应用传代细胞，或者要有充分对照。本试验的具体步骤如下。

1．待检病毒作连续10倍稀释，每一稀释度接种细胞培养3～4管。

2．在37℃培养一定时间，倾去营养液。

3．用Hanks液将细胞单层洗2～3次。

4．加入0．5%红细胞悬液，使接触细胞单层，在室温放置15～30min。

5．倾去红细胞悬液，细胞单层用Hanks液轻洗2次，以除去未吸附的红细胞。

6．在低倍镜下观察，细胞膜上如有血凝素，则有很多红细胞吸附在细胞表面。

7．根据结果计算TCID₅₀。如果只须定性，则病毒不需定量稀释。

二、血吸附抑制试验

1．细胞培养接种病毒，弃去营养液，用Hanks液轻洗如上。

2．每管接种1∶10稀释的抗血清0．2ml，使血清遍及整个细胞单层，血清中不应含有非特异血凝抑制物。另设无血清的对照。

3．室温放置30min。

4．倾去血清，加入红细胞悬液，用Hanks液轻洗如上。

5．置低倍镜下观察，与对照比较，读取结果。如果血清作系列稀释，则可计算血清的抑制滴度。