病毒对几种理化因素的抗性测定

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第595页(1146字)

一、热灭活试验

有些病毒对热敏感,在50℃经30min被灭活,但其敏感性可受营养液中的某些物质的浓度影响,如L-胱氨酸和L-半胱氨酸。因此试验中条件的标准化很重要。

1.将2ml病毒悬液加于试管中,置50℃水浴中30min。

2.同样的病毒悬液在4℃30min作为对照。

3.滴定毒价,比较差异(同氯仿)。

二、阳离子稳定试验

高浓度二价阳离子如MgCl2能稳定某些病毒如肠道病毒和呼肠孤病毒等,使其在50℃经60min不被灭活。另外一些病毒如腺病毒、疱疹病毒和痘病毒等则反增加对热的敏感性。

1.将病毒悬液用1.0mol/L MgCl2作10倍稀释。对照管用蒸馏水作同样稀释(对照)。

2.在50℃水浴1h。

3.滴定毒价,比较两组的差别,判定标准同氯仿试验。

三、酸敏感试验

在pH3溶液中经30min能降低某些病毒的感染力(如口蹄疫病毒),而对另一些病毒没有作用(如水疱病病毒等肠道病毒)。

1.将病毒1份加pH3的Hanks氏液9份,在25℃放置2h。另用pH7.2的Hanks氏液与病毒悬液作同样处理(对照)。

2.试验组用0.1mol/L NaOH调节pH到7.2。

3.滴定毒价,比较两组差别,判定标准与氯仿试验同。

四、胰蛋白酶敏感试验

某些病毒如肠道病毒、冠状病毒和轮状病毒等对胰蛋白酶有较强的抵抗力,而另一些病毒如疱疹病毒和痘病毒等对此敏感。

1.将胰蛋白酶用PBS(pH7.4)配成1%溶液,过滤灭菌。

2.病毒悬液用3000r/min离心30min,取上清加等量胰酶溶液充分混合。另取病毒悬液加等量PBS混合,与试验组同样处理作为对照。

3.37℃放置1h,加入4倍量犊血清,以终止胰酶作用。

4.滴定毒价,比较两组差异,判定标准与氯仿试验同。

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