啮齿动物的细小病毒
书籍:兽医微生物实验诊断手册
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第609页(765字)
该组病毒包括大鼠细小病毒(即Kilham氏大鼠病毒)、仓鼠骨质溶解病毒(即H-1病毒)和小鼠的细小病毒等成员。这些病毒有各自的血清型,HI试验、中和试验和补体结合试验均无交叉反应,荧光抗体试验确有一种或多种共同抗原,但与其他细小病毒无共同抗原。
一、样品采集
通常取人工感染急性期病鼠的各种脏器,包括肾、肝、肺、血液和大肠等。粪、尿也含毒,但滴度较低。人工感染的慢性病例,可取脑组织。自然感染一般为潜伏性的,较难分离到病毒。
二、病毒分离
(一)细胞培养 在大鼠胚胎细胞作继代培养24h尚未长成单层时接种病料,培养10~14天,盲传2~3代,多数都能产生CPE。细胞先出现颗粒样变化,继而圆缩脱落。对不呈现CPE的毒株,可用HA试验或免疫荧光检测培养液和细胞单层。必须有未感染的细胞同步盲传作对照。
直接由感染组织作细胞培养以分离病毒可能效果更佳。
(二)动物试验 可经脑内或腹腔内人工感染出生后24h的乳仓鼠。首次分离时常无临床症状,可于感染后7~10天取肝、肺、肾等作盲传。三种病毒均可在接种后4~6天引起乳仓鼠死亡。
三、血清学试验
该组病毒的血凝作用很强,而且对pH和温度均无苛求。HA试验以豚鼠、仓鼠和人O型红细胞效果较好。HI试验和病毒中和试验也是病毒鉴定和抗体调查的有效方法,具体步骤可参阅前述。中和试验常在鼠胎或仓鼠胎细胞培养物上进行,多采用血清稀释法,病毒剂量为1×103TCID50/0.1ml,接种后观察5~14天。