麻疹病毒属
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第747页（3497字）
本属包括麻疹、犬瘟热及牛瘟三种病毒，它们的抗原有类属关系。病毒含有血凝素，但无神经氨酸酶。
一、犬瘟热病毒(Canine distemper virus)
犬瘟热是狗科和鼬科动物的一种严重的传染病，死亡率很高，本病毒只有一个血清型。
根据流行病学资料和临床症状对犬瘟热可以作出初步诊断。包涵体检查是诊断的重要辅助方法，但检出率仅50%左右。
(一)样品采集 死后采集脾、胸腺、淋巴结、肝、肺和膀胱。如有脑炎症状，尚需采集小脑。生前诊断采集鼻腔和眼的分泌物及抗凝和不抗凝血液。小犬从心脏，大犬可从前肢内侧静脉采血；貂可剪去前趾使血液自然流出，用毛细吸管吸取，也可以从心脏采血。供分离病毒的标本应采于体温开始上升或急性死亡的病兽。
(二)病毒分离
1．细胞培养 将接种标本磨成1∶10稀释的匀浆，取上清液接种于犬、貂或犊牛肾细胞及鸡胚成纤维细胞培养。哺乳动物的细胞被感染发生颗粒变性和空泡形成，常伴有合胞体形成。接种后2～3天，可用荧光抗体法检出培养物中的病毒抗原。鸡胚成纤维细胞于接毒后2～3天，可见细胞圆缩，细胞单层出现拉网现象。
2．鸡胚接种 将标本液0．1mL接种7～8日龄鸡胚的绒尿膜上，每份接种5～7枚。一般在接种后18～48h或更久的时间，绒尿膜发生水肿，出现灰白色或红白色的斑点，在肿大的上皮细胞浆内有包涵体。致死的鸡胚出现充血，点状出血，头部出血较为严重。若接种后5～6天仍不死亡，应进行剖检，观察病变并作病毒检查。对死亡的鸡胚应作细菌培养，以排除细菌污染。
3．动物试验 是分离病毒较可靠的方法。将标本液3～5ml给幼犬、貂皮下、肌肉或腹腔注射。幼犬经过3～7天的潜伏期后，体温升至39．5～42℃，持续8～48h，此时病犬的眼、鼻先流出水样后变为脓性的分泌物，同时表现倦怠，食欲缺乏。然后经过1～2天的无热间歇期，继之体温再度增高，病情恶化，常出现呕吐、下痢和呼吸道卡他性炎症并发展为肺炎。貂经4～12天潜伏期后，口腔周围出现水泡，眼和鼻流出分泌物，然后结痂，体温上升至40℃以上，并发生下痢和肺炎。最急性型的病兽呈现神经症状，口吐白沫，搐搦而死。接种兽病死或扑杀，采集标本用荧光抗体技术，琼扩试验和中和试验检测病毒抗原。
(三)血清学试验
1．荧光抗体(RFA)法
(1)标本制作
①细胞培养物制片
刮取法：将培养瓶壁上生长的细胞轻轻刮下，离心，取细胞沉淀物制膜。
玻片培养法：将盖玻片放进培养瓶内，加细胞悬液培养，细胞在盖片上生长，接毒后3日取出玻片，以磷酸缓冲液漂洗，冷丙酮固定后染色。
②动物组织标本片的制作
生前制片：犬可取抗凝血作白细胞涂片。貉和貂可取前趾或尾尖末稍血涂片，用0．83%的NH4Cl或蒸馏水将全部红细胞分解，水洗后用冷丙酮固定，染色。
死后制片：对死亡动物立即取肠系膜淋巴结及脾制压片，经冷丙酮固定后染色。
(2)染色和结果判定按常规。
2．中和试验 将待检血清作倍比稀释，加等量已知病毒液(100～1000EID50／0．1ml)，37℃作用1h后，以0．2ml接种7～8日龄鸡胚绒尿膜，每一稀释度接种4～5枚鸡胚，置35～37℃孵育7天，每日照蛋及时检出死胚，检查绒尿膜上有无灰白色病斑及水肿。中和试验需设下列对照：①待检血清不加病毒；②阴性血清加病毒；③阳性血清加病毒。
二、牛瘟病毒(Rinderpest virus)
牛瘟病毒感染牛和其他反刍动物，患畜在发热期间病毒存在于血液、组织液、分泌液和排泄物中。临床特征是粘膜发生严重出血性卡他，伴有坏死性口炎和胃肠炎。该病毒只有一个血清型，但毒力差异较大，有的毒株只引起温和性感染。
(一)样品采集 采集脾、淋巴结、发热期的抗凝血和痊愈牛血清。牛瘟病毒对理化因素抵抗力很弱，所采标本应置冰瓶内，立即送检。甘油能破坏它的感染力，故不宜用于样品保存。
(二)病毒分离——一般应用细胞培养
1．用抗凝血分离白细胞，或用脾、淋巴结制成5%悬液，稍加离心沉淀。
2．将样品液接种牛细胞或绿猴肾细胞，24h后洗去接种物。每2～3天换维持液一次。
3．在接种后3天于细胞单层的边缘开始出现细胞病变，但某些毒株于接种后10～12天仍无明显变化。特征性细胞病变是形成星状细胞或合胞体，出现核内和胞浆内包涵体。
4．为了尽快得出诊断结果，可同时向部分接种管的营养液中加入免疫血清作病毒抑制试验。
(三)血清学试验
1．中和试验 检查血清中的特异性抗体。
(1)采痊愈牛血清，用原血清或稀释10～100倍的血清，每ml加100个家兔最小感染量的冻干牛瘟兔化弱毒(即冻干牛瘟兔化淋、脾弱毒1∶10稀释1ml)，于37℃作用1h或4℃18～24h。
(2)给家兔耳静脉接种1ml。如兔不发病，就证明血清中有牛瘟抗体存在。
(3)此试验需设置阳性血清对照组及牛瘟兔化弱毒对照组。但需注意，若被检牛已患过牛瘟或进行过预防接种，则此法就不能肯定新近所患的疫病是否牛瘟。
2．琼扩试验 用于检查标本中的病毒抗原。
抗原制备：牛瘟病毒的沉淀原不耐热，易腐败，因此应取新鲜或冷藏的淋巴结加适量生理盐水，磨碎制成乳剂，以2000r／min离心10min，取上清液为抗原。阳性对照抗原可从接种兔化弱毒的家兔获得。
阳性血清：可获自高免家兔。
试验方法如下。
①被检抗原和阳性对照抗原分别滴入周围孔内，中央孔滴加阳性血清。同时设阴性血清对照。
②反应于室温进行，经12～48h检查结果。本试验敏感性较低，且病牛血清中沉淀抗体的浓度往往较低，因此难以用于直接从病牛血清中查证牛瘟抗体。
(四)免疫保护试验
1．将病牛的新鲜淋巴结、脾组织悬液离心沉淀，取上清液按每兔1ml，经静脉注射2～3只家兔。
2．每天测温2次，10～14天后，与对照兔1～2只同时接种5～10个最小发病量的牛瘟兔化弱毒(即1∶100稀释的牛瘟兔化弱毒冻干毒约1ml)，经24～48h，对照兔体温上升，超过正常体温1～2℃，稽留24～48h以上，食欲减退，鼻分泌物增多，精神不佳，怀孕后期的母兔可能流产，于接种后3～14日死亡。典型病变为肠淋巴滤胞显着肿胀，并布满均匀一致的灰白色粒状坏死点。而试验组兔不发生变化。则可判定被检病料中含有牛瘟病毒。