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旋毛虫病肉集样消化法

出处:按学科分类—农业科学 农业出版社《动物检疫手册》第74页(855字)

本法是用消化酶在最适温度和最佳酸碱度条件下进行生物化学消化,而且有坚韧角质层的旋毛虫体表不被消化,从而保留了虫体。经沉淀,从沉渣中可检出虫体。

(一)材料准备

1.胃蛋白酶(每克含酶30000单位)。

2.0.4%胃蛋白酶水溶液。

3.盐酸(浓度36-38%,比重1.19)。

(二)操作方法

1.检样的采取。按流水线上胴体编号顺序,每头取横隔膜肌脚数克,分别放在序号相同的采样盘或塑料袋内送检。

2.捣碎肉样。每头份肉样随机剪取1-2克(并保留所剩样品备查),按编号顺序集中20、50或100头份肉样为一个大样,置捣碎机内,加入肉样量5-10倍的0.4%胃蛋白酶溶液量的一半,捣碎数秒钟至肉样成絮状,并混悬于浑浊的消化液中。

3.消化。将放有磁棒的集虫器小心放入烧杯中,将捣碎液倒入烧杯中,用所剩一半量胃蛋白酶溶液分数次冲洗捣碎机容器,洗液并入烧杯中,用盐酸(每100毫升消化液中,加入约0.7毫升)调整pH为1.8-2.0,然后置烧杯于加热磁力搅拌器上,在38-41℃下,中速搅拌3-5分钟。

4.收集沉淀物。消化后,从烧杯中取出集虫器,从集虫器内取出磁棒后卸下集虫筛,用适量清水分数次充分冲洗沉积于集虫筛上的残渣,洗液、残渣均收集于表面皿中。

5.镜检。将表面皿置于显微镜(或解剖镜)的载物台上,用低倍镜观察,镜检时将玻皿前后、左右晃动,仔细检查有无虫体、包囊及虫体残骸。

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