鸡传染性法氏囊病琼脂扩散试验操作技术

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《动物检疫手册》第152页（831字）

(一)材料准备

1．试剂：

(1)标准抗原：冻干制剂。

(2)标准阳性血清：系冻干制剂。

(3)待检血清：从患病鸡群采取的血清。

2．器材：微量注射器或盐水接头及乳胶头、金属打孔器(直径4毫米)等。

(二)操作方法

1．琼脂板的制备：将溶化均匀的琼脂液(琼脂糖1克、NaCl8克、苯酚0．1毫升、蒸馏水100毫升，隔水煮沸溶解)倒入干净的平皿，制成厚度3毫米的琼脂板，冷凝后加盖放普通冰箱一周内使用。

2．打孔：反应孔现用现打，按7孔图型打孔，孔径为4毫米，孔间距3毫米。

3．抗原及血清的添加：点样前在装有琼脂的平皿上贴上胶布写上日期及编号，中央孔加入抗原，1、4孔加注阳性血清，2、3、5、6孔各加入受检血清，添加至孔满为止，盖上皿盖，置湿盒内，在37℃条件下进行反应，逐日观察3天，并记录结果。

(三)结果判定

阳性：当检验用标准血清与抗原孔之间，有明显致密的沉淀线时，受检血清孔与抗原孔之间形成沉淀线；或者阳性血清的沉淀线末端向毗邻的受检血清孔内侧偏弯者，此种受检血清判为阳性。

阴性：受检血清孔与抗原孔之间不形成沉淀线，或者阳性血清孔与抗原孔之间的沉淀线向毗邻的受检血清孔直伸或向受检血清孔外侧偏弯者，此种受检血清判为阴性．