硬羊茅和红羊茅的氢氧化氨－荧光测定法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第78页（1947字）

当利用NH₄OH－荧光测定时，先用0．5%稀NH₄OH液喷施羊茅幼苗，然后移至紫外光下时，红羊茅幼苗根则发出黄色荧光，硬羊茅幼苗则发出绿色荧光。虽然这一研究还不够完善，但这一测定的数学处理已被发展，可按种子样品绿色荧光幼苗根和黄色荧光幼苗根的百分率来计算。一般仅填报荧光百分率，或者用作检测这些混入其他种的种子批的手段。由于在两个种中种子的大小有差异，因此，荧光百分率不能用于测定样品中红羊茅和硬羊茅种子的百分率。

1．测定程序

(1)NH₄OH－荧光测定的种子应培养在白色滤纸发芽床上，在光下(不超过100支烛光)培养。蓝色吸水纸也可用作发芽床，但滤纸更为适宜。

(2)发芽床经用蒸馏水或无离子水湿润后，放入带的塑料盒里。

(3)将100粒种子，四次重复的种子分别播入发芽床，但须注意，种子之间留有间隔，以防止幼苗根互相缠绕。

(4)在播好后，各重复倾斜地放在15－25℃发芽箱内，其倾斜角度约为60－65°。

(5)在培养幼苗期间应调节到适宜的水分水平，保持各重复水分的一致。

(6)在培养第10天，拿出全部不发芽种子，并将太小不能鉴定的幼苗和不正常幼苗移到新发芽床上，重新放回发芽箱内培养。但在转移时，不能损伤种子或幼苗。

(7)把正常幼苗保留在原来发芽床上，用0．5%稀NH₄OH液(取1．67ml，浓度为28%－30%的浓的NH₄OH原液，加入98．33ml蒸馏水配成)，小心喷施幼苗。

(8)大约经1分钟后，移至紫外光下，测定并记录发出绿色和(或)黄色荧光幼苗根的种子数。

(9)在培养的第14天，重新按第8和第9步骤，对移到新发芽床的正常幼苗进行NH₄OH－荧光测定。这时测定的幼苗是在第10天转移到新发芽床的种子或幼苗所长成的正常幼苗。如果在第14天结束时，仍有幼苗未达到充分发育而不能鉴定时，还须按第7、8、9步骤重做，而延长7天。

(10)可利用下列公式计算绿色荧光根幼苗或黄色荧光根幼苗百分率：

但不能把绿色荧光或黄色荧光根幼苗百分率作为样品中红羊茅或硬羊茅种子存在的百分率。但填报荧光百分率。

2．注意事项

浓的氢氧化氨具有腐蚀性，谨防灼烧。并且其蒸气有强烈的刺激性。如果吃下将会致命。因此，应防止吸入氨蒸气。装有氨的容器应密封好，保存在25℃以下。在测定时，可在适当通风处进行，但最好利用0．5%稀氨液，并在防气罩下进行。处理后应用水充分洗涤。如利用稀氨液测定时，也可在普通实验室条件下操作，但必须注意氨液瓶标签标明的浓度，确保安全。

【参考文献】：

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