小麦苯酚染色法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第92页（2626字）

1．ISTA法 数取小麦净种子样品400粒，每重复100粒，放在蒸馏水中浸过夜，倒去水后，放在加过几滴约1%苯酚溶液垫有滤纸的培养皿里，经过数小时后，按籽粒颜色深浅进行分类，计算品种纯度。

2．AOSA法 从净种子中数取400粒，每重复100粒。先鉴别出硬粒小麦、白皮或红皮小麦。将种子放入小烧杯的自来水中，室温下浸16小时。然后倒去水，将种子均匀地排列在培养皿的白色滤纸上，腹沟朝下背朝上，并用1%苯酚溶液透湿滤纸，盖好培养皿盖子。经4小时后，观察记录小麦种子的颜色反应各个等级的种子数，并与对照样品作比较，计算品种纯度。

美国品种颜色反应实例：

硬粒小麦苯酚反应颜色：

浅褐色品种有：“Calvin”、“Coalter”、“Vic”；混合色品种有：40%浅褐色，60%深褐色的有“Cando”。

红皮小麦苯酚反应颜色：

浅褐色(或浅棕色)品种有：“Triumphb 4”、“Mcnair1813”、“Trison”；

深棕色或黑色品种有：“Arthur 71”、“Abe”、“Angus”、“Lancota”。

混合色品种有：6%浅棕色，94%深棕色－黑色的有：“Arthus”。

白皮小麦苯酚反应颜色：

浅黄褐色品种：“Augusta”、“Gencsse”；

深棕色品种：“Tonia”、“Feilder”。

AOSA替换的快速法：基本方法同上述一样，但种子样品预先用热水浸泡10分钟，而不用水浸16小时。其他步骤同上。

3．快速法 数取试验样品100粒，2次重复，分别放入培养皿，加入1%苯酚溶液浸15分钟，然后将种子移入苯酚溶液浸润的培养皿里滤纸上，并盖上一层同样苯酚溶液浸润的滤纸，再加盖，放入40℃恒温箱里1－2小时后，进行鉴定计数，计算品种纯度。

4．附加资料

①配制1%苯酚溶液：称取5g苯酚结晶(U．S．P等级)，加入500ml蒸馏水。

②将配好苯酚溶液装入棕色玻瓶，保存在低温条件下。

③配好苯酚溶液经3个月后就不能再使用。

④经福美双杀菌剂处理的种子，在测定时要求比未经处理样品延长反应时间。

【参考文献】：

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