研究半纤维素在纤维细胞壁中分布的方法

出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《常用非木材纤维碱法制浆实用手册》第73页（713字）

研究半纤维素在纤维细胞壁中分布的方法主要采用化学剥皮法或利用电子显微镜技术的“骨架法”或氧化“染色”法。

1．化学剥皮法

在不同润胀条件下使纤维部分酯化，在纤维外表面产生一层环形圆柱形的酯类物质，然后用适当的溶剂把这层酯类物质溶解下来(剥皮)，生成酯的溶液，用硫酸将酯水解后，用色谱法分析酯的水解液。留下未酯化的纤维残余物。用同样方法酯化、“剥皮”、分析，可以得出沿纤维细胞壁径向分布的半纤维素的含量及糖类组分的情况。

2．“骨架法”

根据纤维细胞壁的半纤维素高聚糖可以溶于碱，也可以用稀酸水解使之分离的性质，用综纤维素为试样，用碱抽提或稀酸水解除去半纤维素以后，在试样上留下“骨架”。利用电子显微镜观察“骨架”，与除去半纤维素前的细胞壁相比较，就可以了解半纤维素的分布情况。

3．“染色法”

利用半纤维素的还原性醛末端基容易被氧化成羧基，某些金属离子能与羧基反应，置换出羧基上的氢离子而把金属离子接到半纤维素上。由于重金属离子对电子的散射力强，在电子显微镜图象上显出较深“颜色”而容易观察。从“染色”深浅程度可以观察半纤维素在细胞壁中的分布情况。操作过程包括：制备综纤维素——氧化(NaClo₂酸性条件下氧化)——染色(KMnO₄等)——脱水——浸渍——包埋——超薄切片——电镜观察。