突变的诱导

出处：按学科分类—生物科学 农业出版社《植物细胞培养手册》第132页（1757字）

在体细胞遗传的研究中，体现了单倍体细胞培养物的独特价值。突变细胞系是特别重要的。但是突变的大多数是隐性，因此，它在未突变的显性基因存在下的二倍体细胞中不表达。

学者们用单倍体愈伤组织细胞研究不同诱变剂，如辐射和化学药剂的效应。单细胞和离体花粉优于完整植株，它们能植板和进行大规模筛选，同微生物应用的技术相类似。实际上利用细胞培养物，现在已成功地分离出若干突变细胞系，通过广泛地工作已得到各种各样的抗性无性系，如抗药、抗植物毒素、抗盐、抗寒冷、抗除莠剂、抗病毒和抗线虫。

Tulecke(1960)用L一精氨酸(5—7mM)取代培养基中激素，从银杏花药分离出需精氨酸突变系，采用离体花粉培养技术，大量花粉如同单个细胞一样，相对地易受诱变因素作用和分离出突变体。这种无性系对突变的恢复相当有效。

用单倍体细胞和原生质体，能在一些植物种中分离出突变体。已经获得了抗链霉素、5-溴脱氧尿苷、蛋氨酸、马铃薯胞囊线虫和不同温度的细胞无性系、组织和完整植株。

在使用花药培养技术时，Nitsch等(1969)主张用X-射线(1500—3000rad)照射幼小植株获得突变体，其花的形状、大小和颜色显示高比例异常体，而且有些明显是嵌合体。进一步研究，在附加10^-6M N—3—硝基苯基—N—苯基脲培养基上培养烟草花药后，Nitsch(1972)观察到了开白花的突变型。Devreux和Saccardo(1971)使烟草花芽接受X-射线(1000伦琴)，随后取其花药培养。由此得到的单倍体植株大约有50%呈异常表现型，它有约6%植株的染色体异常。单倍体烟草原生质体和细胞对紫外线和γ射线有不同辐射敏感性，从这种培养物已再生出抗缬氨酸突变体植株。

【参考文献】：

〔1〕Bajaj Y．P．S．，Reinert，J．，and Heberle E．1977 Factors enhancing in vitro production of haploid plants in anthers and isolated mierospores．In：La Culture des Tissue et Cellules des Vegetaux(R．J．Gautheret，ed．)p．47—58．Mason Press，Paris，New York．

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〔3〕Nitsch，C．1974 Pollen culture—A new technique for mass production of haploid and homozygous plants．In：Haploids in Higher Plants-Advances and Potential(K．J．Kasha，ed．)pp．123—135．Univ．Guelph Press，Guelph．

〔4〕Sunderland，N．and Dunwell，J．M．1977 Anther and pollen culture．In：Plant Tissue and Cell Culture(H．E．Street，ed．)pp．223-265，Blackwell．Oxford．