展望

出处:按学科分类—生物科学 农业出版社《植物细胞培养手册》第359页(1748字)

为了取得最好结果,植物细胞转化试验,要产生高频率转化体,有价值的DNA(带有或不带农杆菌作为微注射体)必需与大群体目标细胞共培养,以利选择稳定方式掺入需要基因的那些细胞。就此观点,用上述方法,取单个植物原生质体作为目标细胞,与用于细菌、酵母和哺乳动物细胞遗传学的相似。成百万植物细胞能暴露在转化细菌或DNA中,用原生质体群体作为出发点。

DNA转化和共培养是不同体系,各有利弊。共培养法优点是转化频率相对高,转化非混杂的一定大小的转移DNA。如果一个基因引入T-区域,将能与T-DNA掺入植物基因组。缺点是只适用于双子叶植物。另一方面,DNA转化是适用单子叶植物的最有希望方法,由于它不依赖于农杆菌与双子叶植物间的特定细胞-细胞互作。如果DNA不是T-DNA顺序引入细胞的话,可经互转化而发生。事实上,DNA转化可能不依赖于冠瘿肿瘤体系,如果有适宜选择标记,也可能用于其它来源的DNA顺序。

遗传工程应用于生物技术和农业目的尚属伊始。但是强烈认识到已具备了必要手段,可用于双子叶植物体系的试验。如用于植物的基因载体,以Ti质粒为基础构成的,和单细胞转化法,以个别单细胞为出发点,产生成熟开花植株。当然尤需改进。单子叶植物必须进行更多试验,方才开始思考应用问题。

【参考文献】:

〔1〕Hooykaas,P.J.J.and R.A.Schilperoort 1983 The molecular genetics of crown gall turnorigensis.In:Advances in Genetics(E.W.Caspari and l.G.Scandalois,eds.)pp209-283,Academic Press,New York.

〔2〕Krens,F.A.,L.Molendijk,G.J.Wullems and R.A.Schilpercoort 1982 Invitro transformation of plant protoplasts with Ti-plasmidDNA.Nature 296:72-74.

〔3〕Marton,L.G.J.Wullems,L.Molendijk and R.A.Schilpercoort 1979 In vitro transformation of cultured cells from Nicotiana tabacum by Agrobacterium tumefaciens.Nature 277:129-131.

〔4〕Memelink,J.,G.J.Wullems and R.A.Schilperooort 1983 Nopalime T-DNA is maintainedduring regeneration and generative propagation of transformed tobacco plants.Mol.Gen.genet.190:516-522.

〔5〕Wullems,G.J,L.Molendijk,G.Ooms and R.A.Schilpercoort 1981 Differential expression of crown gall tumor markers in transformants obtained after in vitro Agrobacterium tumefaciens-induced transformation of cell wall regenerating protoplasts derived from Nicotiana tabacum.Proc.Natl.Acad.Sei.U.S.A.78:4344-4348.

上一篇:水稻 下一篇:植物细胞培养手册目录
分享到: