苹果和土壤中残留量检测方法(方法二)

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第33页（2694字）

中国农业大学理学院 明九雪

样本中丙硫克百威和克百威用丙酮／水提取，3-羟基克百威用0．37mol／L盐酸溶液回流提取，二氯甲烷液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱仪(NPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 氮磷检测器(NPD)

组织捣碎机

旋转蒸发器

层析柱

2．主要试剂

丙酮、二氯甲烷、石油醚(60～90℃)、无水乙醇、盐酸、氯化钠、硝酸银

无水硫酸钠 600℃烘烤8h

弗罗里硅土 60～100目，140℃处理5h，加5%水减活

丙硫克百威标准品、克百威标准品、3-羟基克百威标准品

3．检测步骤

3．1 丙硫克百威、克百威

3．1．1 提取

3．1．1．1 苹果

称取40g样本，以1∶1比例加入磷酸缓冲液(pH8)，捣碎匀浆。加2mL0．1mol／L硝酸银和100mL丙酮，搅拌浸泡1h，抽滤，滤渣用70%丙酮溶液洗涤、过滤。合并滤液在K-D浓缩器内除丙酮。

3．1．1．2 土壤

称取50g样本，加10mL缓冲液(pH8)，100mL丙酮／水(7∶3，V／V)浸泡过夜，离心，取出上清液。残渣用50mL丙酮水溶液浸泡洗涤、离心。合并上清液，浓缩除丙酮。

3．1．2 净化

将浓缩后的提取液转移至分液漏斗中，加50mL饱和氯化钠溶液，用50mL、25mL、25mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，用无水硫酸钠脱水，置于K-D浓缩器中浓缩至近干。

层析柱用弗罗里硅土装柱，上下端为无水硫酸钠层。将上述残余物用石油醚溶解并转移至柱顶，用乙酸乙酯／石油醚／异丙醇(30∶70∶1，V／V／V)洗脱。收集70mL洗脱液，浓缩定容至相应体积，待测。

3．2 3-羟基克百威

3．2．1 提取

苹果匀浆样本及土样用0．37mol／L盐酸溶液100mL转移至300mL烧瓶中，于95℃水浴中回流1h，用0．25mol／L盐酸溶液30mL从冷凝管顶端冲洗冷凝管，烧瓶冷却后过滤，滤渣用0．25mol／L盐酸50mL抽洗。合并滤液于分液漏斗中，加30g氯化钠，用100mL二氯甲烷液-液分配。水相用50mL二氯甲烷洗两次，合并二氯甲烷相，脱水、浓缩至近干，待净化。

3．2．2 净化

层析柱为弗罗里硅土柱，两端为无水硫酸钠。样本上柱，用乙酸乙酯／石油醚(30∶70，V／V)作淋洗液，收集0～110mL弃去。再用100mL乙酸乙酯／石油醚／异丙醇(40∶60∶1，V／V／V)洗脱。收集洗脱液，浓缩至近干。加10mL无水乙醇和2滴盐酸，置95℃水浴回流40min。回流液冷却后加40mL水，10mL饱和氯化钠溶液，用30mL、15mL、15mL石油醚萃取。合并石油醚相，脱水、浓缩、定容至相应体积待测定。

3．3 气相色谱法测定

检测器 NPD

色谱柱 0．8m×3mm玻璃柱，2%OV-17／ChromoSorbWAW60～80目

检测温度 柱温240℃；进样口260℃；检测器260℃(丙硫克百威)

柱温为170℃；进样口240℃；检测器240℃(克百威)

柱温180℃；进样口220℃；检测器220℃(3-羟基克百威)

载气 高纯氮，50mL／min

燃烧气 氢气3．6mL／min，空气150mL／min

保留时间 丙硫克百威7．2min，克百威6．7min，3-羟基克百威8．5min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 丙硫克百威3×10^－11g，克百威3×10^－11g，3-羟基克百威6×10^－10g。

最低检测浓度 丙硫克百威0．005mg／kg，克百威0．005mg／kg，3-羟基克百威0．01mg／kg。

回收率 苹果和土壤中添加丙硫克百威、克百威、3-羟基克百威0．05～5．0mg／kg时，平均回收率分别为79．8%～92．9%、81．5%～89．9%、73．5%～85．6%。见表1-5-3。

相对标准偏差1．0%～8．9%，见表1-5-3。

表1-5-3 苹果和土壤中丙硫克百威、克百威、3-羟基克百威添加回收率及相对标准偏差实验结果