(1)甘蓝和土壤中残留量检测方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第110页（2555字）

上海市农业科学院植物保护研究所 王伟民 盛亚红

样本用甲醇提取，弗罗里硅土柱层析净化，盐酸水解，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

高速组织捣碎机

旋转蒸发器

超声波清洗器

电热恒温水浴锅

国际型振荡器

层析柱

2．主要试剂

乙腈(光谱纯)、甲醇(重蒸)、苯(重蒸)、正己烷(重蒸)、乙醚、异丙醇、盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、弗罗里硅土(60～100目)、七氟丁酸酐、对氯苯胺(纯度＞99．7%)

除虫脲标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 甘蓝

称取20g样本，加入200mL甲醇，高速匀浆2min，抽滤，滤渣用100mL甲醇洗涤。合并滤液，取1／2滤液于圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干。

3．1．2 土壤

称取20g样本，加入200mL甲醇，振荡1h，抽滤，滤渣用100mL甲醇洗涤。合并滤液，取1／2滤液于圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

上述残余物用125mL去离子水和10mL乙腈溶解后，转移到分液漏斗中，用50mL×3正己烷进行液-液分配。合并正己烷相于另一分液漏斗，用50m×3乙腈进行液-液分配，合并乙腈相于圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至近干，氮气吹干。

3．2．2 柱层析净化

3．2．2．1 柱层析净化

在层析柱内依次装入2g无水硫酸钠、20g弗罗里硅土和2g无水硫酸钠，用50mL苯预淋。在上述残余物中加入15mL苯，用超声波助溶，转移到层析柱上。用10mL×2苯洗涤圆底烧瓶，并加到柱上，再用40mL苯／乙醚／异丙醇(45∶45∶10，V／V／V)进行洗脱，收集全部洗脱液于圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至近干，氮气吹干。

3．2．2．2 盐酸水解

圆底烧瓶中加入100mL3．6mol／L盐酸溶解和几粒玻璃珠。加热回流10h，使除虫脲水解成对氯苯胺。冷却后，用25mL去离子水洗涤冷凝管内壁，将水解物转移到分液漏斗中，用25mL水洗烧瓶，合并入分液漏斗中。加入50mL苯进行液-液分配，弃去苯。水相用12．5mol／L氢氧化钠调至pH＞10，用50mL×3苯萃取对氯苯胺。合并苯相，用装有20g无水硫酸钠的漏斗过滤脱水，用25mL苯洗涤无水硫酸钠。合并滤液浓缩至约20mL。加入0．2mL七氟丁酸酐，盖紧瓶塞，在50℃条件下反应3h。

3．2．2．3 柱层析净化

在层析柱内依次装入2g无水硫酸钠、10g弗罗里硅土和2g无水硫酸钠，用50mL正己烷预淋。将衍生液转移到层析柱内，用100mL正己烷／乙醚(9∶1，V／V)洗涤样本瓶，并分3次转移到层析柱内。收集全部洗脱液，用旋转蒸发器(35℃)浓缩至干，加入正己烷，超声波助溶，定容，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 1m×3mm玻璃柱，1．5%OV-17／Shimalile WAW DMCS，80～100目

检测温度 柱温150℃；进样口250℃；检测器250℃

载气 高纯氮，20mL／min

进样量 1μL

保留时间 1．27min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－11g。

最低检测浓度 甘蓝和土壤均为0．01mg／kg。

回收率 甘蓝添加除虫脲0．1～5．0mg／kg时，平均回收率为84．2%～88．0%；土壤添加除虫脲0．01～5．0mg／kg时，平均回收率为85．0%～90．0%。见表1-16-1。

相对标准偏差 2．8%～21．2%，见表1-16-1。

表1-16-1 甘蓝和土壤中除虫脲添加回收率及相对标准偏差实验结果