(4)萝卜、植株和土壤中残留量检测方法(方法一)

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第141页（2611字）

中国科学院动物研究所 李薇 仇少萍 伍一军 王睿 陈仪

样本用甲醇提取，SPE-C₁₈及弗罗里土柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

捣碎机

台式振荡器

旋转蒸发器

层析柱 Φ10mm×300mm，具聚四氟乙烯活塞

2．主要试剂

石油醚(60～90℃)、丙酮、二氯甲烷、无水硫酸钠、氯化钠

活性炭 黑色无定型粉末，经酸化135℃烤干

弗罗里硅土 60～100目，650℃处理6h，使用前135℃处理4h，加3%水减活

SPE-C₁₈柱，1g／6mL

硅藻土 100～120目，650℃处理6h

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

称取20g样本置于250mL三角瓶内，加甲醇70mL，振荡1h后，抽滤。用80mL甲醇冲洗滤渣，合并滤液并用甲醇转移至分液漏斗中。

3．1．2 萝卜

称取20g样本置于250mL三角瓶内，加入甲醇35mL、蒸馏水25mL，过夜。振荡1h后，用铺有5g硅藻土的布氏漏斗抽滤。用50mL甲醇冲洗滤渣。在旋转蒸发器上(40℃)蒸去甲醇后，再用甲醇将剩余滤液转至分液漏斗中。

3．1．3 植株

称取20g样本置于250mL三角瓶内，加50mL甲醇／水(1∶1，V／V)，振荡1h后，用铺有5g硅藻土的布氏漏斗抽滤。用80mL甲醇冲洗滤渣，合并滤液并用甲醇转移至分液漏斗中。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

在萝卜样本的滤液中加入100mL5%氯化钠溶液(植株、土壤滤液中加入50mL10%氯化钠溶液)和100mL石油醚，用力振荡2min，静置分层。石油醚相用50mL10%氯化钠溶液(土壤、植株用100mL5%氯化钠溶液)反萃取，弃去石油醚相。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸，摇匀。用40mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷相并过无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(25℃)浓缩至近干后，自然蒸发至干。

3．2．2 柱层析净化

3．2．2．1 萝卜与植株

在层析柱内依次加入3～4cm无水硫酸钠、1g活性炭／弗罗里硅土(1∶4，W／W)和3～4cm无水硫酸钠，用20mL甲醇预淋。用30mL甲醇将上述蒸残物洗入柱顶并淋洗，弃去淋出的甲醇。用100mL丙酮／甲醇(4∶6，V／V)洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发器(35℃)浓缩至近干后，自然蒸发至干。用甲醇定容(植株样本定容至10mL，萝卜样本定容至5mL)，待测。

3．2．2．2 土壤

将SPE-C₁₈柱用10mL甲醇预淋活化，再用10mL去离子水淋洗，用水泵将柱子中残留水分抽干。用10mL石油醚将样本洗入柱内，弃去流出的石油醚。用20mL石油醚／乙酸乙酯(3∶7，V／V)洗样本瓶并洗脱样本，收集洗脱液，用旋转蒸发器(43℃)浓缩至近干后，自然蒸发至干，用甲醇定容至10mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 254nm

色谱柱 Aichrom Reliasil C₁₈，250mm×4．6mm×5μm

流动相 甲醇／水(50∶50，V／V)

流速 0．8mL／min

保留时间 6min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2．5×10^－11g。

最低检测浓度 萝卜、植株和土壤均为0．05mg／kg。

回收率 萝卜、植株和土壤中添加吡虫啉0．05～5．00mg／kg时，平均回收率分别为82．9%～95．8%、89．1%～105．9%和85．0%～86．7%。见表1-21-6。

相对标准偏差 1．6%～7．9%，见表1-21-6。

表1-21-6 萝卜、植株和土壤中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果