(4)花椰菜和土壤中残留量检测方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第484页（2903字）

吉林农业大学资源与环境学院 逯忠斌 张浩 王岩 徐威

样本用乙酸乙酯弱碱性溶液提取，经二氯甲烷液-液分配、氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

组织捣碎机

振荡机

旋转蒸发器

层析柱 Φ12mm×150mm

2．主要试剂

甲醇(紫外光谱纯)、二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、无水硫酸钠、盐酸、硅胶、活性碳、助滤剂

精噁唑禾草灵标准品、精噁唑禾草灵代谢物标准品

3．检测步骤

3．1 花椰菜植株中精噁唑禾草灵母体的检测步骤

3．1．1 提取

称取20g切碎的样本，加入50mL丙酮和20mL0．05%碳酸氢钠溶液，捣碎1min。在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤，再用50mL丙酮和20mL0．05%碳酸氢钠溶液淋洗滤渣。在旋转蒸发器上蒸去丙酮。

3．1．2 液-液分配

将剩余水溶液转入分液漏斗中，用40mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，在35℃下减压浓缩至2mL。

3．1．3 柱层析净化

在层析柱内依次装入1g助滤剂、5g氧化铝、0．5g助滤剂／活性炭(20∶1，V／V)及少许无水硫酸钠，用甲苯预淋。将浓缩液移入层析柱内，用100mL甲苯淋洗，收集甲苯洗脱液，浓缩至干，用甲醇定容至2mL，待测。

3．2 土壤中精噁唑禾草灵母体及代谢物的检测步骤

3．2．1 提取

取30g样本，置于具塞锥形瓶中，加入50mL乙酸乙酯和40mL0．05%碳酸氢钠溶液，振荡提取30min，在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤。用20mL乙酸乙酯和20mL0．05%碳酸氢钠溶液冲洗锥形瓶及滤渣。

3．2．2 液-液分配

合并滤液，分离水相与乙酸乙酯相。将水相移入分液漏斗中，加入1mol／L盐酸2mL，调pH为2～3，用50mL、50mL、30mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相过无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(35℃)减压浓缩至干，待定容测代谢物；将乙酸乙酯相用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至2mL，待层析柱净化。

3．2．3 柱层析净化

在层析柱内依次装入1g助滤剂，5g氧化铝，0．5g助滤剂／活性碳(20∶1，V／V)及少许无水硫酸钠，用甲苯预淋。将上述乙酸乙酯相蒸残物分别用甲苯溶解后移入层析柱中，用100mL甲苯淋洗，弃去前5mL，收集后95mL洗脱液，在40℃下减压浓缩至干，用甲醇定容至2mL，测母体。

3．3 植株中精噁唑禾草灵代谢物的检测步骤

3．3．1 提取

取20g切碎样本，置于捣碎机中，加入70mL甲醇／0．1mol／L盐酸(90∶10，V／V)提取液，捣碎1min。在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤，用70mL提取液淋洗滤渣。

3．3．2 液-液分配

合并滤液，加入2ml盐酸，用50mL、40mL、40mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，在35℃下减压浓缩至2ml，待柱净化。

3．3．3 柱层析净化

在层析柱内依次装入1g助滤剂，4g硅胶和少许无水硫酸钠，用乙酸乙酯预淋。加入样本浓缩液，用35mL乙酸乙酯淋洗并弃去。再用40mL甲醇洗脱。收集甲醇洗脱液，浓缩并定容至1mL，待测。

3．4 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 240nm

色谱柱 C₁₈柱，4．6mm×25cm

流动相 甲醇／水(80∶20，V／V)，0．7ml／min

进样量 5μL

保留时间 精噁唑禾草灵17．5min，代谢物4．8min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．0×10^－9g。

最低检测浓度 花椰菜0．01mg／kg，土壤0．005mg／kg。

回收率 花椰菜和土壤中添加精噁唑禾草灵0．01～1．00mg／kg，平均回收率分别为88．4%～85．8%和87．4%～89．2%。见表3-17-6。

相对标准偏差 0．5%～2．0%，见表3-17-6。

表3-17-6 花椰菜和土壤中精噁唑禾草灵添加回收率及相对标准偏差实验结果

6．花椰菜和土壤中精噁唑禾草灵及其代谢物液相色谱测定谱图

见图3－17-4。

图3-17-4 花椰菜和土壤中精噁唑禾草灵及其代谢物液相色谱测定谱图