染色法、培养基和试剂
出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《焙烤工业实用手册》第642页（22149字）
(一)革兰氏染色液的配制及染色法
(1)染色液：结晶紫染色液：1g结晶紫溶解于20mL乙醇溶液(95%)中，然后与80mL草酸铵(1%)溶液混合。
革兰氏碘液：将1g碘与2g碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。
沙黄复染液：将0．25g沙黄溶解于10mL乙醇(95%)中，然后用90mL蒸馏水稀释。
(2)染色法：将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染色1min水洗，滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗，滴加95%乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s，水洗，滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。
(3)结果：革兰氏阳性菌呈紫色；革兰氏阴性菌呈红色。
(二)生化试验培养基和试剂
1．糖发酵管
(1)成分：
牛肉膏 5g 0．2%溴麝香草酚蓝溶液 12mL
蛋白胨 10g 蒸馏水 1000mL
氯化钠 3g 葡萄糖 0．5%
磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 2g (pH7．4)
(2)制法：按上述成分配好后，按0．5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min，其他各种糖发酵管，可按上述成分配好后，分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min，另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌，将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
(3)说明：蔗糖不纯，加热后会自行分解者，应采用过滤法除菌。
2．西蒙氏柠檬酸盐琼脂
(1)成分：
氯化钠 5g 琼脂 20g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．2g 蒸馏水 1000mL
磷酸二氢铵 1g 0．2%溴麝香草酚蓝溶液 40mL
磷酸氢二钾 1g (pH6．8)
柠檬酸钠 5g
(2)制法：先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后，加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。
3．葡萄糖铵琼脂
(1)成分：
氯化钠 5g 琼脂 20g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．2g 蒸馏水 1000mL
磷酸二氢铵 1g 0．2%溴麝香草酚蓝溶液 40mL
磷酸氢二钾 1g (pH6．8)
葡萄糖 2g
(2)制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。
4．氨基酸脱羧酶试验培养基
(1)成分：
蛋白胨 5g 1．6%溴甲酚紫－乙醇溶液 1mL
酵母浸膏 3g L－氨基酸或DL－氨基酸
葡萄糖 1g 0．5g／100mL或1g／100mL
蒸馏水 1000mL (pH6．8)
(2)制法：除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入各种L－或DL氨基酸(赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸、L－氨基酸按0．5%加入，DL－氨基酸按1%加入)，再进行校正pH至6．8，对照培养基不加氨基酸、分装于灭菌的小试管内，每管0．5mL，上面滴加一层液体石蜡，115℃高压灭菌10min。
5．蛋白胨水(靛基质试剂)
(1)成分：
蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g 蒸馏水 1000mL
氯化钠 5g (pH7．4)
(2)制法：按上述成分配制，分装小试管，121℃高压灭菌15min。
(3)靛基质试剂：
柯凡克试剂：将5g对二甲氨基甲醛溶解于75mL戊醇中，缓加浓HCl 125mL。
欧－波试剂：将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL(95%)乙醇内，然后缓缓加入浓HCl20mL。
6．尿素琼脂(pH7．2)
(1)成分：
蛋白胨 1g 琼脂 20g
氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL
葡萄糖 1g 20%尿素溶液 100mL
磷酸二氢钾 2g (pH7．2±0．1)
0．4%酚红溶液 3mL
(2)制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶，121℃高压灭菌15min，冷至50～55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液，尿素的最终浓度为2%，最终pH为7．2±0．1，分装于灭菌试管内，放成斜面备用。
7．氰化钾培养基(KCN)
(1)成分：
蛋白胨 10g 蒸馏水 1000mL
氯化钠 5g 0．5%氰化钾溶液 20mL
磷酸二氢钾 0．225g (pH7．6)
磷酸氢二钠 5．64g
(2)制法：将除氰化钾以外的成分配好后，分装烧瓶，121℃高压灭菌15min，放在冰箱内使其充分冷却。每100mL培养基加入0．5%氰化钾溶液2．0mL(最后浓度为1∶1000)，分装于12mm×100mm灭菌试管，每管约4mL，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4℃冰箱内，至少可保存2个月，同时将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。
(3)说明：KCN剧毒，使用时应小心，勿沾污，以免中毒。夏天分装培养基应在冰箱内进行，试验失败主要原因是封口不严，KCN逐渐分解，产生HCN气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生成，因而造成假阳性反应。
8．磷酸盐缓冲溶液
(1)贮藏液成分：
磷酸二氢钾 34g 蒸馏水825mL
1mol／L氢氧化钠溶液 175mL (pH7．2)
(2)制法：先将磷酸盐溶于500mL蒸馏水中，用1mol／L氢氧化钠校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000mL。
(3)稀释液：取贮藏液1．25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装每瓶100mL或每管10mL，121℃高压灭菌15min。
9．明胶磷酸盐缓冲液
(1)成分：
明胶 2g 蒸馏水 1000mL
磷酸氢二钠 4g (pH6．2)
(2)制法：加热溶解，校正pH，121℃高压灭菌15min。
10．ONPG培养基
(1)成分：
邻硝基酚β－D－半乳糖苷(ONPG) 60mg 1%蛋白胨水(pH7．5) 30mL
0．01mol／L磷酸钠缓冲液(pH7．5) 10mL
(2)制法：将ONPG溶于缓冲液内加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管中，每管0．5mL，用橡皮塞塞紧。
(3)试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物满环接种，于36℃±1℃培养1～3h观察结果。如果β－半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。
(三)一般培养基和专用培养基
1．肉浸液肉汤
(1)成分：
绞碎牛肉 500g 磷酸氢二钾 2g
氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL
蛋白胨 10g
(2)制法：将绞碎、去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL，混合后放冰箱过夜，除去液面的浮油，隔水煮沸0．5h，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量，加入蛋白胨、氯化钠和磷酸氢二钾，溶解后校正pH为7．4～7．6，煮沸并过滤，分装烧瓶，121℃高压灭菌30min。
2．血琼脂平板
(1)成分：
pH7．4～7．6豆粉琼脂 100mL 脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL
(2)制法：加热溶化琼脂，冷至50℃，以灭菌手续加入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板，亦可分装灭菌试管，置成斜面，亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。
3．营养琼脂
(1)成分：
蛋白胨 10g 琼脂 15～20g
牛肉膏 3g 蒸馏水 1000mL
15%氢氧化钠 2mL
(2)制法：将除琼脂氢氧化钠以外的各成分溶解于蒸馏水中，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH7．2～7．4，加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化，分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。
(3)说明：此培养基可供一般细菌培养使用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1．5%；如做成平板或斜面则应为2%。
4．乳糖胆盐发酵管
(1)成分：
蛋白胨 20g 0．04%溴甲酚紫水溶液 25mL
猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g 蒸馏水 1000mL
乳糖 10g (pH7．4)
(2)制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
(3)说明：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
5．乳糖发酵管
(1)成分：
蛋白胨 20g 蒸馏水 1000mL
乳糖 10g (pH7．4)
0．04%溴甲酚紫水溶液 25mL
(2)制法：将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装3mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
(3)说明：双料乳糖发酵管除蒸馏水外其他成分加倍。
6．EC肉汤
(1)成分：
胰蛋白胨 20g 磷酸二氢钾 1．5g
3号胆盐(或混合胆盐) 1．5g 氯化钠 5g
乳糖 5g 蒸馏水 1000mL
磷酸氢二钾 4g
(2)制法：将上述成分混合，溶解后，分装有发酵倒管的试管中，121℃高压灭菌15min，最终pH为6．9±0．2。
7．GN增菌液
(1)成分：
胰蛋白胨 20g 磷酸氢二钾 4g
葡萄糖 1g 磷酸二氢钾 1．5g
甘露醇 2g 氯化钠 5g
柠檬酸钠 5g 蒸馏水 1000mL
去氧胆酸钠 0．5g (pH7．0)
(2)制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正pH，分装每瓶225mL，115℃高压灭菌15min。
8．HE琼脂
(1)成分：
胨 12g 琼脂 18～20g
牛肉膏 3g 蒸馏水 1000mL
乳糖 12g 0．4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
蔗糖 12g Andrade指示剂 20mL
水杨素 2g 甲液 20mL
胆盐 20g 乙液 20mL
氯化钠 5g (pH7．5)
(2)制法：前面7种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液，将琼脂加入于600mL蒸馏水内，加热溶解，加入甲液和乙液于基础液内，校正pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷至50～55℃，倾注平板。
(3)说明：
①此培养基不可高压灭菌
②甲液的配制
硫代硫酸钠 34g 蒸馏水 100mL
柠檬酸铁铵 4g
③乙液的配制
去氧胆酸钠 10g 蒸馏水 100mL
④Andrade指示剂
酸性复红 0．5g 蒸馏水 100mL
1mol／L氢氧化钠溶液 16mL
将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液数小时后，如复红退色不全，再加氢氧化钠溶液1～2mL。
9．SS琼脂
(1)基础培养基成分及制法：
牛肉膏 5g 琼脂 17g
膘胨 5g 蒸馏水 1000mL
三号胆盐 3．5g
将牛肉膏、膘胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中，将琼脂加入600mL蒸馏水中，煮沸使其溶解，再将两液混合，121℃高压灭菌15min，保证备用。
(2)完全培养基成分及制法：
基础培养基 1000mL 10%柠檬酸铁溶液 10mL
乳糖 10g 1%中性红溶液 2．5mL
柠檬酸钠 8．5g 0．1%煌绿溶液 0．33mL
硫代硫酸钠 8．5g
加热溶化培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，混合均匀，校正到pH7．0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。
(3)说明：
①制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h使用。
②煌绿溶液配好后应在10d以内使用。
③可以购SS琼脂的干燥培养基。
10．伊红美蓝琼脂(EMB)
(1)成分：
蛋白胨 10g 2%伊红溶液 20mL
乳糖 10g 0．65%美蓝溶液 10mL
磷酸氢二钾 2g 蒸馏水 1000mL
琼脂 17g (pH7．1)
(2)制法：将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用，临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。
11．三糖铁琼脂(TSI)
(1)成分：
蛋白胨 20g 硫酸亚铁铵［Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O］ 0．2g
牛肉膏 5g 硫代硫酸钠 0．2g
乳糖 10g 琼脂 12g
蔗糖 10g 酚红 0．025g
葡萄糖 1g 蒸馏水 1000mL
氯化钠 5g (pH7．4)
(2)制法：将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，加热沸腾，以溶化琼脂。加入0．2%酚红水溶液12．5mL，摇匀，分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层，121℃高压灭菌15min，放置高层斜面备用。
12．半固体琼脂
(1)成分：
蛋白胨 1g 氯化钠 0．5g
牛肉膏 0．3g 琼脂 0．35～0．4g
蒸馏水 100mL (pH7．4)
(2)制法：按以上成分配好，煮沸使溶解，并校正pH，分装小试管，121℃高压灭菌15min，直立凝固备用。
(3)说明：本培养基供动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验等用。
13．葡萄糖半固体发酵管
(1)成分：
蛋白胨 1g 葡萄糖 1g
牛肉膏 0．3g 琼脂 0．3g
氯化钠 0．5g 蒸馏水 100mL
1．6%溴甲酚紫酒精溶液 0．1mL pH 7．4
(2)制法：将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正pH后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和葡萄糖，分装小试管，灭菌121℃15min。
14．5%乳糖发酵管
(1)成分：
蛋白胨 0．2g 2%溴麝香草酚蓝水溶液 1．2mL
氯化钠 0．5g 蒸馏水 100mL
乳糖 5g (pH7．4)
(2)制法：除乳糖以外的各成分溶解于50mL蒸馏水内，校正pH，将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
(3)说明：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。
15．胰酪胨大豆肉汤
(1)成分：
胰酪胨(或胰蛋白胨) 17g 磷酸氢二钾 2．5g
植物蛋白胨(或大豆蛋白胨) 3g 葡萄糖 2．5g
氯化钠 100g 蒸馏水 1000mL
(2)制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌、溶解，分装后，121℃高压灭菌15min，最终pH7．3±0．2。
16．Baird－Parker氏培养基
(1)成分：
胰蛋白胨 10g 琼脂 20g
牛肉膏 5g 蒸馏水 950mL
酵母膏 1g 30%卵黄盐水 50mL
丙酮酸钠 10g 1%亚碲酸钾溶液 10mL
甘氨酸 12g (pH7．5)
氯化锂(LiCl·6H22O) 5g
(2)制法：增菌剂的配法：30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。
将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，冷至25℃，校正pH，分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min，临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板，培养基应是致密不透明的，使用前在冰箱贮藏不得超过48h。
17．7．5%氯化钠肉汤
(1)成分：
蛋白胨 10g 蒸馏水 1000mL
牛肉膏 3g (pH7．4)
氯化钠 75g
(2)制法：将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，121℃高压灭菌15min。
18．匹克氏肉汤
(1)成分：
含1%胰蛋白胨的牛心浸液 200mL 1∶800三氮化钠溶液 10mL
1∶25000结晶紫盐水溶液 10mL 脱纤维兔血(或羊血) 10mL
(2)制法：将上述已灭菌的各种成分，用无菌手续依次混合，分装于无菌试管内，每管约2mL，保存于冰箱内备用。
19．3．8%柠檬酸钠溶液
(1)成分：
柠檬酸钠 3．8g 蒸馏水 100mL
(2)制法：取柠檬酸钠3．8g，加蒸馏水到100mL，溶解后过滤，装瓶，121℃高压灭菌15min。
(3)说明：兔(人)血浆制备：取3．8%柠檬酸钠溶液1份加兔(人)全血4份，混好静置，则血球下降，即可得血浆进行试验。
20．庖肉培养基
(1)成分：
牛肉浸液 1000mL 可溶性淀粉 2g
蛋白胨 30g 碎肉渣 适量
酵母膏 5g 还原铁粉(铁屑) 0．1～0．2g
磷酸二氢钠 5g 1mol／L氢氧化钠 25mL
葡萄糖 3g (pH7．8)
(2)制法：称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g，加蒸馏水1000mL和1mol／L氢氧化钠溶液25mL，搅拌煮沸15min，充分冷却，除去表层脂肪，澄清、过滤、加水补足至1000mL，加入除牛肉浸液外的各种成分，校正pH。
牛肉浸液分装15mm×150mm试管2～3cm高，每管加入还原铁粉0．1～0．2g或铁屑少许，将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约1cm，上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡0．3～0．4cm，121℃高压灭菌15min。
21．卵黄琼脂培养基
(1)成分：
①基础培养基：
肉浸液 1000mL 琼脂 25～30g
蛋白胨 15g (pH7．5)
氯化钠 5g
②50%葡萄糖水溶液。
③50%卵黄盐水悬液。
(2)制法：制备基础培养基，分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min，临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每瓶加入50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黄盐水悬液10～15mL，摇匀，倾注平板。
22．氯化镁孔雀绿增菌液(MM)
(1)成分：
甲液
胰蛋白胨 5g 磷酸二氢钾 1．6g
氯化钠 8g 蒸馏水 1000mL
乙液
氯化镁(化学纯) 40g 蒸馏水 100mL
丙液
0．4%孔雀绿水溶液
(2)制法：分别按上述成分配好后，121℃高压灭菌15min备用，临用时取甲液90mL，乙液9mL，丙液0．9mL，以无菌操作混合即可。
23．四硫酸钠煌绿增菌液(TTB)
(1)成分：
基础培养基：
多胨或膘胨 5g 蒸馏水 1000mL
胆盐 1g 碘溶液 6g
碳酸钙 10g 碘化钾 5g
硫代硫酸钠 30g 蒸馏水 20mL
(2)制法：将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分瓶每瓶100mL，分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀，121℃高压灭菌15min备用，临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL，0．1%煌绿溶液1mL。
24．亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)
(1)成分：
蛋白胨 5g 磷酸氢二钠 5．5g
乳糖 4g L－胱氨酸 0．1g
亚硒酸氢钠 4g 蒸馏水 1008．5mL
磷酸二氢钾 4．5g 1mol／L氢氧化钠 1．5mL
1%L－胱氨酸－氢氧化钠溶液的配法：称取L－胱氨酸0．1g(或DL－胱氨酸0．2g)，加1mol／L氢氧化钠1．5mL，使溶解，再加入蒸馏水8．5mL即成。
(2)制法：将除亚硒酸氢钠和L－胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，待冷备用，另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，待冷，以无菌操作与上液混合，再加入1%L－胱氨酸－氢氧化钠溶液1mL，分装于灭菌瓶中，每瓶100mL，pH应为7．0±0．1。
25．亚硫酸铋琼脂(BS)
(1)成分：
蛋白胨 10g 柠檬酸铋铵 2g
牛肉膏 5g 亚硫酸钠 6g
葡萄糖 5g 琼脂 18～20g
硫酸亚铁 0．3g 蒸馏水 1000mL
磷酸氢二钠 4g (pH7．5)
煌绿 0．025g
(2)制法：将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中，将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解，将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80℃，将以上液合并，补充蒸馏水至1000mL，校正pH，加0．5%煌绿水溶液5mL摇匀，冷至50～55℃，倾注平皿。
(3)说明：此培养基不需高压灭菌，制备过程不宜过分加热，以免降低其选择性，应在临用前一天制备，贮藏于室温暗处，超过48h不宜使用。
26．DHL琼脂
(1)成分：
蛋白胨 20g 柠檬酸钠 1g
牛肉膏 3g 柠檬酸铁铵 1g
乳糖 10g 中性红 0．03g
蔗糖 10g 琼脂 18～20g
去氧胆酸钠 1g 蒸馏水 1000mL
硫代硫酸钠 2．3g (pH7．3)
(2)制法：将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中，校正pH，再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并加入0．5%中性红水溶液6mL，待冷至50～55℃，倾注平板。
27．WS琼脂
(1)成分：
膘胨 12g 琼脂 15g
牛肉膏 3g Andrade指示剂 20mL
氯化钠 5g 0．4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL
乳糖 12g 甲液 20mL
蔗糖 12g 蒸馏水 1000mL
十二烷基硫酸钠 2g (pH7．0)
(2)制法：除指示剂和甲液外，将其他成分加热溶解，不需消毒，校正pH后加入指示剂和甲液，倾注平板应呈草绿色。
(3)说明：本培养基供沙门氏菌分离用，Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。
28．缓冲蛋白胨水(BP)
(1)成分：
蛋白胨 10g 磷酸二氢钾 1．5g
氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL
磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H22O) 9g (pH7．2)
(2)制法：按上述成分配好后，以大烧瓶装，121℃高压灭菌15min，临用时无菌分装每瓶225mL。
本培养基供沙门氏菌前增菌用。
29．麦康凯琼脂
(1)成分：
蛋白胨 17g 蒸馏水 1000mL
膘胨 3g 乳糖 10g
猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g 0．01%结晶紫水溶液 10mL
氯化钠 5g 0．5%中性红水溶液 5mL
琼脂 17g
(2)制法：将蛋白胨、膘胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中，校正pH7．2，将琼脂加入600mL蒸馏水中，加热溶解，将两液合并，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。
临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至50～55℃时加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。
(3)说明：结晶紫和中性红配好后须经高压灭菌。
30．高盐察氏培养基
(1)成分：
硝酸钠 2g 氯化钠 60g
磷酸二氢钾 2g 蔗糖 30g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．5g 琼脂 20g
氯化钾 0．5g 蒸馏水 1000mL
硫酸亚铁 0．01g
(2)制法：加热溶解，分装后，115℃高压灭菌30min。必要时，可酌量增加琼脂。
(3)用途：分离霉菌用。
31．马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)
(1)成分：
马铃薯(去皮切块) 300g 琼脂 20g
葡萄糖 20g 蒸馏水 1000mL
(2)制法：将马铃薯去皮切块，1000mL蒸馏水，煮沸10～20min。用纱布过滤，补加蒸馏水至1000mL。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装，121℃高压灭菌20min。
(3)用途：分离培养霉菌。
32．孟加拉红培养基
(1)成分：
蛋白胨 5g 1／3000孟加拉红溶液 100mL
葡萄糖 10g 蒸馏水 1000mL
磷酸二氢钾 1g 氯霉素 0．1g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0．5g 乙醇 适量
琼脂 20g
(2)制法：上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加拉红溶液，另用少量乙醇溶解氯霉素，加入培养基中，分装后，121℃灭菌20min。