脏器制药及加工
出处：按学科分类—农业科学 中国轻工业出版社《肉类工业手册》第469页（4848字）
(一)肝素钠的制取
动物的许多组织和器官是生产肝素钠的主要原料，早在1916年科学家们从肝脏中分离出一种具有抗凝血作用的物质，命名为肝素。后来，又发现肝素在哺乳动物的许多组织中都存在，如肠黏膜、肝、肺、胰脏、胎盘、血管等组织和器官。
肝素能阻抑血液的凝固过程，用于防止血栓的形成。因此，肝素在降血脂和提高免疫力方面也有一定的作用。通常用于治疗肾病患者的渗血，急性心肌梗塞症，心脑血管疾病，清除肾病形成的尿毒，配合治疗暴发性流脑败血症、肾炎，防止癌细胞转移等方面。
目前，肝素的精品由药厂生产，粗品主要由屠宰厂提供。由于生产肝素的资源丰富，市场广泛，创汇利润可观。据估计，以四川省为例，如果对全省可生产肝素的资源充分利用，每年可产3000亿单位的肝素粗品，产值达1．4亿元，利润为4000万元。现将生产肝素粗品工艺介绍如下：
1．盐酸－离子交换法
(1)工艺流程
(2)操作要求
提取：将新鲜的肠黏膜放入反应罐内，按3．0%加入氯化钠，用氢氧化钠调pH至9．0，逐步升温至50～55℃，保温2h。继续升温至95℃，维持10min。
离子交换吸附：将提取物用30目筛过滤，待温度降到50℃以下时加入714型碱性Cl型树脂。新树脂用量为2%，搅拌8h后静置过夜。
洗涤：次日除去上层液，收集树脂，用水洗涤，直至上层澄清滤干。用2倍量的1．4mol／L氯化钠搅拌2h，再用1倍量1．4mol／L NaCl搅拌2h，滤干。
洗脱：用3mol／L氯化钠(用量为树脂的2倍)搅拌洗脱树脂8h，滤干。再用1倍量3mol／L氯化钠搅拌洗脱2h滤干。
乙醇沉淀：合并滤液，加入等量的95%乙醇沉淀过滤。除去上清液，收集沉淀物，用丙酮脱水干燥即得粗品。
2．酶解－离子交换法
(1)工艺流程
(2)操作要点
酶解 每100kg新鲜肠黏膜(总固体5%～7%)，加苯酚200mL(0．2%)，气温低时可不加。边搅边加入0．5～1kg(0．5%～1%)绞碎的胰脏，用30%～40%NaOH调pH至8．5左右，升温至40℃(40～45℃)，保温2～3h，pH保持在8左右。然后加入5kg食盐(5%)，升温至90℃左右，用6mol／L HCl调pH至6．5左右，停止搅拌，保温20min，以布袋过滤。
离子交换 当滤液降温至50℃时，用6mol／L NaOH调pH至7．0，加入5kg(5%)D－254强碱性阳离子树脂，搅拌5h左右，交换完毕后弃去液体。
洗涤与洗脱用自来水漂洗树脂至水清，用2mol／L NaCl(约与树脂体积等量)搅拌15min，弃去洗涤液，再用1．2mol／LNaCl(2倍树脂量)，同法洗涤两次。再用5mol／LNaCl(1／2树脂量)洗脱1h。收集洗脱液，再用3mol／L NaCl(1／3树脂量)，同法洗涤两次，合并洗脱液。
乙醇与丙酮洗涤、干燥 用纸浆将洗脱液过滤一次，澄清，加0．9倍(以体积计算)活性炭处理过是90%乙醇，放阴凉处沉淀8～12h。除去上清液，沉淀中补加蒸馏水，每100kg肠黏膜加水300kg，再加入4倍量95%乙醇，冷却6h，收集沉淀。用无水乙醇脱水一次，丙酮脱水两次，再用五氧化二磷真空干燥，即得肝素钠粗品。
3．大孔树脂工艺
(1)工艺流程
(2)操作要点
①提取、盐解：称取鲜肠黏膜(总固体8%～10%)1000kg，加水1000kg和工业食盐60kg，用40%NaOH调pH至9．5，在60～65℃下保温搅拌，5h后，用饱和明矾水调pH至7．5～8．5(用明矾约8kg)。90℃条件下保温10min，用100～120目筛过滤。滤渣中加500kg水和15kg工业食盐，同前述条件再提取一次。把两次滤液合并，约有1800L，肝素效价一般为25单位／mL，4．5万单位／kg肠黏膜。
②离子交换：吸附提取液冷却至40℃以下，pH为7．5～8．5，加入占肠黏膜重5%的1299×9树脂(计50kg，约为71L)。搅拌吸附8～10h(气温高时加30～50mL苯甲酸钠防腐)，用80～100目筛收集树脂，用自来水漂洗至不混浊为宜。装柱时，使柱床直径与高度比为1∶4～6。
③洗涤与洗脱：可分为酸盐水洗和碱盐水洗。酸盐水洗的树脂先用1柱床体积蒸馏水洗，再用5柱床体积(约400L)，反复用0．05mol／L HCl－0．5mol／L NaCl或0．05mol／L HCl0．8mol／L NaCl或0．05mol／L HCl－1．1mol／L NaCl洗5h，再用蒸馏水洗至pH为5左右，再用4～5柱床体积(约为300L)1．2mol／L NaCl洗涤。各步骤都洗至流出液加2倍乙醇无沉淀为止，流通速度为1柱床体积／h。再用约1柱体积3mol／L NaCl(约71L)洗脱肝素，流速为0．2～0．25柱体积／h，并用无热源容器收集对天青染料显色反应的部分。盐碱水洗是用蒸馏水洗涤树脂后，再用5～6柱体积pH为12，1．1mol／L NaCl(约400L)洗涤树脂至用2倍乙醇检查无沉淀生成为止，流速为1柱床体积／h。此后，用1～2柱床体积蒸馏水洗至近中性，最后用1柱床体积／h，3mol／L NaCl洗脱，流速为0．2～0．25柱床体积／h，收集对天青染料显色反应的部分。
④上述两法中，洗涤液一般每毫升含肝素1～2单位，洗脱液中每毫升含肝素400～600单位。
乙醇沉淀：3mol／L NaCl的洗脱液(约70L)加1～2倍95%乙醇，同时搅拌10～30min，放置4～8h或过滤。然后除去上清液，将沉淀转入3或4号重熔玻璃漏斗中过滤。也可用离心法分离，沉淀加蒸馏水1．5～2L溶液，抽滤至澄清。用6mol／L盐酸调pH至2．0～2．5，再抽滤至澄清。用2mol／L氢氧化钠调pH至6．0～7．0。并外加3mol／L氯化钠和蒸馏水至6～9L，使盐酸浓度为1mol／L，再加1～2倍乙醇。所得沉淀用3∶1或5∶1的醇－水浸泡两次，95%乙醇洗一次，丙酮洗2次，45℃真空干燥4～6h，即得成品150～200g(精品)，效价为150～170单位／mg，收率为3万单位／kg肠黏膜。
(二)胆红素的制取
胆红素是从胆汁中提取的物质。胆红素及其钙盐在临床医学上具有镇静、镇惊、解热、降低血压及促进红血球新生的特效，是治疗白血病的药物之一。此外，胆红素对乙型脑炎病毒和W256癌细胞具有强抑制功效，是当今国内外医药上的紧俏原料。这里介绍两种提取胆红素的工艺。
1．离子交换法
(1)工艺流程
(2)操作要点
①胆汁的碱液处理：取优质新鲜的猪胆，用双层纱布过滤，除去杂质和油脂，然后将2mol／L NaOH溶液倒入胆汁中(每千克胆汁加碱液21mL)，搅拌均匀后升温至96～98℃，保温2～3min，得到鲜红的胆红素溶液。
②树脂的预处理：将树脂用80℃以上的热水浸泡1～2h，然后把发胀的树脂均匀装入圆玻璃柱中，在交换柱中加入80℃以上的热碱水，pH在12左右。冲洗到柱中流出水的pH在9．5以上为止。树脂的用量与胆汁量的体积比为1∶4。
③吸附：将交换柱中的碱水放干净，加入80℃以上的胆汁水进行吸附，3～5min后放出。这一过程可重复1～2次，直至流出的胆汁水淡至无色为止。
④降温：吸附完全以后，在交换柱中加入冷水和亚硫酸氢钠(每千克胆汁加入5～10g)，洗至常温，流出的pH为8左右。
⑤酸化：在树脂柱中加入盐酸溶液进行酸化(盐酸溶液量1kg，冷水中加入36%左右浓盐酸21mL)，此时流出的溶液pH为1～2即可，1kg树脂需1～2kg盐酸溶液。
⑥去杂、脱附：用30%以上酒精溶液反复淋洗交换柱，除去杂质，直到流出液的pH为5～6。然后反复三次加入氯仿脱附，其用量约为树脂的2倍。
回收氯仿提取胆红素三次脱附流出的氯仿溶液合并收集在烧瓶中，放在水浴锅内进行蒸馏，温度控制在65～75℃，直至氯仿被全部蒸出为止，氯仿蒸汽经冷凝后回收重用。将残留液收集在垫有定性滤纸的布氏漏斗中进行抽滤，再用酒精冲洗一次，将滤纸取出后放入烘箱中，在60℃条件下干燥2～3h，在滤纸上即产生结晶的胆红素产品。
2．胆红素钙盐法
(1)工艺流程
猪胆汁→石灰乳处理→酸化→精制→洗涤干燥→成品
(2)操作要点
①石灰乳处理：将新鲜的猪胆汁中加入20%的石灰乳，在不断搅拌下加热至50～60℃，有白沫浮起时将其全部除掉，加热到70℃时有胆红素钙盐小颗粒，到95℃时，浮起橘黄色胆素钙盐，随即用纱布过滤，得到钙盐。
②酸化：取钙盐加适量水搅成糊状，过80目筛，加入0．5%～1．0%亚硫酸氢钠，边搅拌边加入10%盐酸，使pH为1～2时静置20min，过滤后得到沉淀。随后加入90%乙醇混合成糊状，再加入同量的亚硫酸氢钠和95%的乙醇，再用1∶1盐酸调节pH为2～3，沉淀16h后除去上清液，将其干燥即得到胆红素粗品。
③精制干燥：将粗品胆红素用4倍氯仿提取3～4次进行蒸馏，干燥后即可得稍好的产品。