细菌用玻璃器皿的准备

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《鸡病诊断技术手册》第75页（2352字）

(1)用过的玻璃器皿的处理

【消毒或灭菌】用过的玻璃器皿包括培养后弃之的平皿、试管，盛过病原微生物或有病原微生物污染过的吸管、玻片、三角瓶等。这些物品在洗涤前必须进行灭菌。

①平皿、试管、三角瓶等均放在高压蒸气灭菌锅内，121℃处理30分钟。

②吸管、玻片、盖玻片等可浸泡于5%石炭酸或2%－3%来苏儿中48小时。在浸泡吸管的玻筒底部应垫以适量纱布或玻璃纤维，防止投入吸管时，损坏吸管尖。

③含有固体培养基的平皿、试管或含有油脂、液体石蜡、凡士林的试管等，应于高压灭菌后趁热将其中的培养基或油脂倒掉，并趁热洗涤。

④凡含有血液或血清的玻璃器皿，在洗涤前应将血液和血清倒进烧杯或其他容器中，并用自来水稍作洗涤后，再进行灭菌。否则血液或血清因加热而凝固于容器中，不易倒出，有时遗留痕迹。

⑤凡吸取琼脂、血液的吸管，不论是否需要消毒，均应于用后立即以热水(吸琼脂者)或用冷水(吸血液者)冲洗干净，然后再进行消毒或放置，否则血液和琼脂将凝固在吸管中，不易取出，增加洗涤的困难。

【洗涤】

①将消毒处理过的玻璃器皿浸泡于清水中，用毛刷或试管刷沾上洗衣粉，刷去油污，然后用清水冲洗2－3次。

②经清水清洗后如仍有污迹，可置于1%－5%苏打液中煮沸半小时，再趁热洗涤一次，用水冲洗数次后，玻璃器皿上应没有水渍。

③凡沾有油脂的器皿，在洗涤前应和未沾油脂者分开浸泡，分开洗涤：沾有油脂者如不易洗涤时，可置5%洗衣粉水中煮沸半小时，或用市售洗涤灵加入热水中再进行洗涤。

④将吸管从消毒液中取出，用细铁丝或解剖针取出棉花。然后将吸管浸泡于肥皂水或洗衣粉水中，用吸管刷洗涤吸管内部，洗干净后，用自来水冲洗吸管内部(可用吸管冲洗装置，也可用橡皮管，一头接自来水，一头接吸管)，冲洗20－60秒，如仍有污迹，应重新洗涤。用蒸馏水冲洗后，置干燥箱中烘干。如用于细胞培养则烘干后应过清洁液，取出后用自来水冲洗干净并浸泡过夜，再用蒸馏水冲洗，三蒸水冲洗、烘干、包装。

【玻璃器皿的干燥】洗干净的玻璃器皿可放在清洁的木架上，令其自然干燥，也可以放在50－60℃的干燥箱中迅速烘干。在烘干过程中应注意干燥箱的通风，温度也不宜过高。

【玻璃器皿的包装】凡是要求无菌的玻璃器皿在灭菌前均需包装妥当，以免灭菌后取用时又被外界杂菌所污染。各种玻璃器皿的包装方法，要求均不一样，同时也因操作者本人的习惯等有所不同，但都必须遵循一个原则，即包装严密，易于打开，便于操作。

①试管及三角瓶的包装。试管及三角瓶开口处均需严密包装，口小者应直接塞入棉塞，口大者，则应用纱布包裹棉塞后再塞入，开口过大者可不加棉塞直接用纸包装，如烧瓶、量筒的包装等。

②吸管的包装。用锥子塞少许棉花于吸管口端，起过滤作用。棉塞大小要适当，不可过松或过紧，如过松，吸吹时会随气流上下移动而失去作用，过紧则阻塞空气的流通而使吹吸不便。塞上棉花后，用长度、宽度适当的纸条从吸管尖部开始包裹起来。如有金属筒，可将包好的吸管置于金属筒中进行灭菌。或用纸包成一束或一捆进行灭菌。

③平皿的包装。用适当的包装纸将适当数量(5付或多一些)的平皿包成一包，进行灭菌，或置金属筒中进行灭菌。

④滤器的包装。由于滤器多采用高压灭菌，整个滤器又往往在手提式高压锅中放不下，故滤器多分开包装。用双层包装纸把滤器包严后用纸绳扎紧。三角瓶口处用双层包装纸包严后扎紧。抽滤器处用锥子塞上适量的棉花后，用纸包好。滤膜滤器必须分开包装，以免使滤膜破碎。

【玻璃器皿的灭菌】玻璃器皿的灭菌一般采取干热灭菌(干烤)160℃2小时，也可以用高压蒸气121℃30分钟。

(2)新购入玻璃器皿的处理新购入的玻璃器皿由于往往附着有游离的碱质而易洗涤。在用前须用1%－2%盐酸溶液浸泡一天，以中和碱质，然后再用洗衣粉水洗涤，除去遗留的酸质，最后用清水冲洗干净。干燥包装及灭菌方法同上。

(3)玻片的处理

①用过的玻片的处理。用过的载玻片和盖玻片须分别浸泡于消毒液中经36－48小时后取出，用清水将消毒液冲洗干净后再在洗衣粉水中煮沸30－60分钟，最后用清水冲洗干净。若一次不能洗净者，可重煮一次。洗净后擦干或晾干，保存于干净容器中或用纸包好保存。也可将晾干的玻片放在酒精溶液中，用时再行擦干。

②新购入的玻片由于附着有游离的碱质，洗涤前应先用1%－2%盐酸浸泡过夜，次日取出，用洗衣粉水洗涤干净，再用清水冲洗，晾干保存。