嗅鞘细胞移植在临床上的初步应用
出处：按学科分类—医药、卫生 中山大学出版社《脊髓损伤》第532页（2138字）
由于诸多原因，在将嗅鞘细胞应用于临床治疗脊髓损伤方面国内远远领先于国外。沈慧勇等首先分离、纯化、培养成功了人胚嗅鞘细胞，并对其生物学特性进行了一系列的研究，还掌握了人胚嗅鞘细胞的超低温冻存及复温技术，并发现复温以后的人胚嗅鞘细胞活力同复温前，并且降低了免疫原性。该项技术的掌握为嗅鞘细胞的临床应用提供了充足的来源。低温冻存为嗅鞘细胞移植修复急性脊髓损伤奠定了坚实的基础，沈慧勇等以此为基础在国内首先开展了嗅鞘细胞移植治疗急性脊髓损伤。黄红云等将来自于4个月以上中期引产胚胎的嗅球细胞分离后，培养在含有10%小牛血清的D／F培养液内3～4天，然后于DMEM纯化嗅鞘细胞培养液内继续培养2～3周，消化细胞并制成细胞浓度为1×107ml左右单细胞悬液备用。他们所选择的嗅鞘细胞移植的病号必须符合以下条件：脊髓损伤伤后时间超过0．5年，脊髓损伤部位没有压迫性病变，脊髓没有横断性解剖断裂。其具体情况为：23例患者，男16例，女7例，年龄为25～55岁，受伤原因为创伤性脊髓损伤和硬膜外血肿造成的急性压迫性损害；19例患者临床表现为完全性，4例为不完全性脊髓损伤；伤后时间为0．5～8．5年。脊髓损伤部位：17例为颈段，6例为胸段。其中21例患者伤后曾行脊髓减压手术，23例患者均接受过不同种类的神经营养或神经生长因子治疗。全麻下行病变节段后方入路，切开硬膜，显露出脊髓。在脊髓损伤部位与正常脊髓上下交界处分两点各注入0．05ml嗅鞘细胞悬液，约5×105个。术后给予止血、抗感染等处理。嗅鞘细胞移植后2周～2个月，采用美国脊髓损伤学会制定的评分标准进行术前和术后随访评定对比。其结果为：嗅鞘细胞移植术后7～10天，按美国脊髓损伤学会制定的评分标准检查患者，并与术前的检查结果对比，23例患者损伤的脊髓功能均有改善。在随后2周～2个月的随访观察中，仍呈继续改善趋势，如表22－4所示。
表22－4 23例患者术前术后的脊髓功能平均分数
在本研究中，19例临床表现为完全性和4例不完全性脊髓损伤患者，嗅鞘细胞移植后的初步结果表明，脊髓神经功能均有不同程度的改善，且呈继续改善趋势。这23例患者，伤后最短者有0．5年，大多数患者为1．5年以上，最长者为8．5年。因此本研究中嗅鞘细胞移植后受损脊髓功能改善这一结果，可排除脊髓功能自身恢复的可能性。这23例患者，其中21例曾接受过手术减压和给予神经营养药物等常规性治疗，但都未有明显效果；因此嗅鞘细胞移植后受损脊髓功能改善，也可排除脊髓减压作用的可能性。这一研究结果还表明脊髓挫裂损伤晚期受损脊髓仍有修复、再生和神经功能恢复的能力，这为临床更晚期脊髓损伤患者的神经功能恢复也带来一线希望。但本研究病例数量较少，而且缺乏更长时间的随访。DeVivo等对比了866例不同年龄的脊髓损伤病人的预后，认为，与16～30岁的病人相比年龄大于61岁的病人容易得肺炎、胃肠道出血、肺栓塞以及肾结石；61～86岁的病人的2年生存率为59%，而16～30岁的患者2年生存率则为95%。因此，他认为与年轻脊髓损伤患者相比，老年脊髓患者预后不良。Yarkony等用MBI(15－task Modified Barthel Index)法给6～88岁的708例脊髓损伤患者评分，研究年龄对自理能力与运动功能的影响。观察发现年龄的差异仅在脊髓完全损伤的病人的以下几种功能中有所体现(年龄小以下功能自主性强，年龄大则相反)：洗澡、上下肢体的穿衣、上楼梯、做椅子以及大便。利用协方差分析方法没有发现年龄和MBI评分之间的联系。嗅鞘细胞移植修复脊髓功能在动物实验和临床应用中都被证实，但这种脊髓的功能恢复是否与年龄有关呢?黄红云等观察了应用嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的171例病人，这些病人的脊髓功能，包括运动功能、轻触觉、刺痛觉用ASIA的评分方法进行打分。结果在移植嗅鞘细胞后在≤20岁组(n=9)、21～30岁组(n=54)、31～40岁组(n=60)、41～50岁组(n=34)和＞51岁组(n=14)运动功能分数平均分别增加5．2±4．8、8．6±8．0、8．3±8．8、5．7±7．3和8．2±7．6；轻触觉评分平均分别增加13．9±8．1、15．5±14．3、12．0±14．4、14．1±18．5和24．8±25．3；刺痛觉评分平均分别增加11．1±7．9、17．2±14．3、13．2±11．8、13．6±13．9和25．4±24．3。除了21～30岁组，在＞51岁组刺痛觉比其他年龄组有明显恢复。所以，该研究认为在嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的病人脊髓运动功能和轻触觉功能的恢复与年龄无关，而在刺痛觉的恢复＞51岁组明显好于除21～30岁组以外的其他组。这种结果的机制以及长期的结果有待于进一步研究。值得一提的是，嗅鞘细胞作为治疗脊髓损伤的一种手段应用于临床还缺乏大量的有关其机制和其长期后果的相关研究，并且还涉及伦理方面的问题。虽然如此，现在的研究已经证明，嗅鞘细胞移植是治疗脊髓损伤的一崭新的、有前途的方法。