组织培养育苗

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《果树育苗手册》第227页（1111字）

1．取材 茎尖分生组织作为外植体在小于0．3毫米的情况下可以得到脱毒的种苗。如结合热处理，则茎尖可以稍稍大一点，也能获得脱毒的效果。于每年6～8月匍匐茎生长充实，尖端生长良好时取材最好。如温室生长的母株则一年四季都可取材。取匍匐茎尖本身或取其长成的秧苗均可。材料取回后，剥去秧苗外层大叶先用流水冲洗2～4小时或更长时间，然后进行表面消毒。

2．消毒 茎尖消毒可采用下述两种方法：一是用70%酒精漂洗一下，用0．1%升汞或6%～8%次氯酸钠浸泡，浸泡时间依材料老嫩而异，一般为2～10分钟，然后转移到超净工作台上操作；二是用70%酒精漂洗一下，用0．1%新洁尔灭浸泡15～20分钟，再用1%过氧乙酸浸泡2～5分钟，移到超净工作台上操作。

3．接种 表面消毒后，在超净工作台上用无菌水冲洗3次，然后置于双筒解剖镜下，剥去幼叶和鳞片，露出生长点，可带1～2个叶原基。如经过热处理的材料，可以带2～4个叶原基，生长点长约0．5毫米；未经热处理的则应取纯的生长点或最多带一个叶原基，将生长点挑出，接入培养基。草莓分化培养基及繁殖培养基为MS+BA0．5～1．0毫克／升，pH5．8。

4．培养条件 培养温度26±2℃，光照强度约1500～2000勒克斯，每日光照10小时。

5．扩大繁殖 接种后一般20～30天即可长成芽丛，待长满一瓶后，约15～20株，将其分离转入新鲜培养基中进行扩大繁殖，如此反复可继代多次，最后可获得大量试管苗。

6．生根培养 将无根试管苗转入生根培养基中诱导发根。生根培养基可用MS或1／2MS附加IBA0．1毫克／升或GA0．1毫克／升+NAA0．05毫克／升或不加激素。可在早春1～2月份集中一批试管苗诱导发根，使其下一步驯化移栽整齐度高。秋季再集中第二批发根，其余则可根据需要继代繁殖。

7．驯化及移栽 将生根试管苗行移至温室中进行驯化。温度以15～20℃为宜，基质选择疏松的沙土掺入少量有机质，空气湿度为80%～100%。移栽后立即灌透水，然后以塑料膜覆盖2周，第三周开始每天揭开薄膜一次放风，逐渐至完全去掉薄膜。期间根据温室情况，每天或隔天喷水1次，以不干为止，但也不能过湿以免烂秧。驯化过程一般需2～3个月，待植株长出5～6片新叶为止，即可移出至大田移栽。