细菌的接种

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第70页(1038字)

一、平板划线法

将检查材料涂布于琼脂平板上,使细菌分散,生长后现菌落。常用连续划线法或方格划线法。

划线时右手执接种环,将环直立于酒精灯外焰烧红,再将环横转,在火焰上转动来回将柄部下端来回烧3次,冷却,蘸取要接种的材料。用左手掌握平皿,无名指与小指在平皿底下,食指在平皿盖上大拇指及中指将平皿盖掀开一口,右手的接种环将材料涂于培养基边缘,成为基线。

连续划线是从基线开始向左右两侧划开,并连续向下移动,连续划成若干条曲线(图5-1)。

图5-1 平板划线法

方格划线是将接种环与基线接触后,并与基线平行划出若干条平行线,然后再划出若干条与基线垂直的线,使整个平板划线呈方格(图5-1)。接种后将平皿盖向下置温箱中培养。

二、斜面接种法

左手持培养基管和样品管,右手持灭菌接种环(火焰灭菌),待冷后,取下棉塞夹持于右手小指与手掌间,用接种环沾取样品少许,插入接种管自下而上在琼脂斜面上连续划线。划线完毕,管口通过火焰,塞上棉塞,竖立,置温箱培养。

三、穿刺接种法

用灭菌接种针蘸取样品少许,由培养基表面中央直刺至底部(勿穿透),再由原穿刺线抽出,若培养基为高层斜面,穿刺后立即在斜面上作划线接种。

本法常用于接种明胶,半固体,三糖铁培养基等。

四、倾注平板法

1.取适当稀释的样品1m1,置于无菌平皿中。

2.倾入已溶化并冷至50℃左右的琼脂培养基约15ml,混匀好,待凝固后,倒置平皿,置温箱培养。

本法多用于饮水、乳、尿液及活菌苗等标本的细菌计数。

五、液体培养基接种法

左手持培养基管和样品管,右手持灭菌接种环,拔下棉塞夹持于右手小指和手掌间,接种环沾取样品少许,插入接种管,在试管内壁与液面接触处轻轻涂擦使样品乳化。接种完毕,塞上棉塞,竖立,置温箱培养。

六、动物接种法

见动物实验部分。

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