日本脑炎病毒

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第685页（1289字）

几乎所有家畜家禽以及许多野生动物和鸟类对本病毒均易感，并出现病毒血症。绝大多数都是隐性感染，只有人、马和猪的一部分可能表现临床症状。马属动物特别是幼驹最易感，感染后多数在几天内康复，少数在发热的同时出现脑炎症状，部分经3～7天死亡，母猪在妊娠期感染后可引起流产，但常无症状。公猪常出现睾丸肿大。该病毒可感染人，特别是儿童引起脑炎症状。小白鼠、仓鼠及猴脑内接种均能引起脑炎，常常致死。

库蚊、伊蚊、按蚊是传播媒介。

(一)样品采集 可采集病毒血症动物的抗凝血，死产小猪的组织，病死动物的脑组织。

(二)病毒分离

1．细胞培养 病料接种仓鼠肾细胞培养，观察7天，如发现细胞病变，即可收获，供传代或鉴定用。

2．鸡胚接种 将血液或脑悬液等接种于7～9日龄鸡胚的卵黄囊内，鸡胚死亡后收获鸡胚，再作乳鼠接种。

3．实验动物试验 应用脑内一皮下或脑内一腹腔接种乳鼠。乳鼠发病时离群、拒食、抽筋、消瘦，此时即可采集脑组织作进一步传代或鉴定。有时需盲传2～3代才出现症状。

4．病毒鉴定 用标准毒株和标准免疫血清与分离株进行交叉补体结合试验，交叉中和试验或交叉血凝抑制试验。也可用小白鼠进行交叉保护试验，即以分离株和标准毒株分别用福尔马林灭活，给三周龄小白鼠皮下接种0．1～0．2ml，共二次，间隔7天。两周后用不同稀释度的标准毒株攻击，采用腹腔攻击脑内刺激法，即在腹腔注射病毒，脑内注射0．03ml肉汤，观察3周，记录各组小白鼠的死亡和保护数。如为同种病毒，则其抵抗标准毒株的攻击量可比对照组高100～1000倍，并与标准毒株免疫组的保护率相近。

5．检查体内的病毒抗原 这是快速诊断法，可用补体结合试验，反向间接血凝、荧光抗体技术，免疫酶技术以及¹²⁵Ⅰ放射免疫测定等方法，检测感染小鼠和感染病马脑内的病毒抗原，都有较高的特异性和检出率。

(三)血清学试验 乙脑在发病后几天内可测出中和抗体和血凝抑制抗体，以后才出现补体结合抗体。通常取双份血清检查，具有诊断意义。另外鉴定动物血凝抑制抗体是IgM还是IgG，有着早期诊断的意义。如果是IgM，即表示该动物是新近感染。将待检血清按常规方法用高岭土或丙酮及红细胞吸收处理后，分成两等份，各0．5ml。在1份中加入等量的0．2mol／L的2-硫基乙醇(1．56ml2-硫基乙醇加于99．44ml生理盐水中)，另1份中加入等量生理盐水，均置37℃lh，随后分别将这两份血清作血凝抑制试验。如果经2-硫基乙醇处理的血清较未处理者抗体效价降低了1／4以下，则判为阳性。