测定原理

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第81页（1350字）

当光照射物质，即光量子打到分子上时，光量子被吸收。同时电子就跃迁到比较高的单线电子激发态或等。这种辐射的吸收是高度专一的，相应于分子的紫外－可吸收光谱。跃迁以后，能量较大的激发态分子，可以通过内转换过程把一部分能量转移给周围的分子，自己回到最低电子激发态的最低振动能级。如果它不通过内转换的方法来消耗能量回到基态，而是通过发射出相应的光量子来释放能量，再回到基态的各个不同振动能级时，就发射出波长较长的荧光。

既然杂交一代种子在育性上有不同，其遗传物质，如核酸、蛋白质和酶等必定有差异。因此，在种子的内源荧光上也可能存在差异。也就是说，以一定波长的光照射在种子上时，使之激发产生的荧光也应有差异。这就需要设计一种测量方法，以测出这种差异。

首先应当测量出最适合的激发光波长，使产生的荧光发射光谱强度最大。其次，应确定荧光发射光谱强度最大处的波长。最后，还需有一个扫描用的槽具。此槽具的背景吸收应全吸收，同时米粒能按顺序有规则地排列，以便于连续扫描。

赖省生等人选择日本岛津公司的CS－910型薄层色谱扫描仪用于上述测定。该仪器能在自动扫描的情况下，测量反射出来的荧光。并扫描结果用CR-IB数据处理器记录和处理。同时设计了一个开有多行平行槽的黑色槽具。米粒能卡紧在槽内不会移动或转动。这样固定后的米粒重复扫描性能良好。

邓鸿德等人(1988)用CS－930型双波长薄层扫描仪也做过类似的研究。他们对各类型杂交水稻高产组合、常规稻优良品种和水稻种质资源等种子进行荧光扫描鉴定的研究，结果发现各种种子有其稳定的、彼此不相同的荧光扫描图，并用人工掺杂的未知样品来检查荧光扫描测定的效果，获得极高命中率。

【参考文献】：

〔1〕颜启传编译(1987)，美国品种纯度检验的实用方法，《种子》1987年第4期，第47－52页。

〔2〕(前苏)菲尔索娃(1956)，种子检验和研究方法第196－198页，农业出版社。

〔3〕颜启传等译(1987)，1985国际种子检验规程，农业出版社。

〔4〕张义君(1984)，三个长豇豆品种种子的鉴别，《种子》杂志，1984年第3期；58－63。

〔5〕赖省生等(1985)，荧光扫描法测定杂交水稻一代种子纯度的研究，《种子》杂志1985年第4期：32－35页。

〔6〕邓鸿德等(1988)，水稻种子的荧光扫描研究，《杂交水稻》，1988年第1期，26－29页。

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