电泳谱带的记录、照相和扫描

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第142页(5336字)

1.记录 染色后按凝胶板上蛋白质或同工酶谱带在座标上按每条谱带的Rf值和谱带类型(图11-5)按比例绘制成电泳图谱。

图11-5 电泳谱带记录和表示方法

电泳谱带可按其谱带宽窄和颜色深浅,分为6级来表示。

2.谱带相对迁移率(Rf值)

谱带迁移距离是指分离胶和浓缩胶界线(或分离胶中样品槽底边)至谱带中心位置的距离。前沿指示剂迁移距离是指分离胶与浓缩胶界线至指示剂中心位置的距离。计算公式如上。从图11-6就可清楚地看到电泳图谱的Rf值及谱带的表达方式。

图11-6 大豆品种同工酶电泳图谱

A、B、C为品种代号;MDH为苹果酸脱氢酶;ME为苹果酸酶;SOD为超氧化物歧化酶;PGM为磷酸葡萄糖变位酶;PHI为磷酸葡萄糖异构酶。

(引自B.J.Cardy,1984)

3.照相 为了保存或发表论文需要,在电泳谱带染色固定后需拍照。

拍照时,将湿胶板放在毛玻璃板上(65×35cm),用4支日光灯管照射,距离30cm进行拍摄。

蛋白质拍照,加桔黄色滤光镜。

酯酶拍照,不须滤光镜。

4.扫描记录 为了计算或比较电泳谱带的宽窄和浓淡程度,以及含量,可用电泳谱带进行光密计扫描记录(如图11-7)。

图11-7 同工酶电泳谱带扫描图

(A.L.Iarson,1987)

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