大豆品种的种子蛋白质电泳鉴定法

出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第237页(833字)

1.一般蛋白质电泳法

(1)配制缓冲液 配制0.1N醋酸缓冲液(pH4.5)。

(2)样品提取和电泳 每0.1g种子样品加入1ml醋酸缓冲液,将种子磨碎,在4℃下浸提1小时,然后在27600×g离心15分钟,吸取0.1ml上清液加蔗糖。用7%凝胶柱或板电泳,然后用Tris-glycine(25mM Tris,pH8.5)电极缓冲液,4mA/管进行电泳跑1.5小时。

(3)染色 用0.2%氨基蓝黑(amaline blue black)溶解在醋酸中,进行染色,然后浸入7%醋酸液中脱色。

(4)品种鉴定 按不同品种蛋白质谱带的不同,区分不同品种。

【参考文献】:

〔1〕西北农业大学编(1978),作物育种学,P531-542,农业出版社。

〔2〕王金陵编(1957),大豆品种纯度检验,黑江省农业厅种子处印。

〔3〕陶嘉龄(1981),种子生理和种子标准,P15-20,浙江农业大学农学系种子教研组整理印刷。

〔4〕浙江省农科院育种栽培所着(1964),农作物田间试验记载项目及试行标准,PP74-79,《浙江农业科学》编辑部。

〔5〕B.J.Cardy et al(1984).Identification of Soybean Cultivars using isoenzyme electrophoresis,Seed Sci.& Technol,12:943-954。

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