大豆种子愈创木酚－过氧化物酶显色法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第235页（1544字）

1．引言 Buttery和Buzzell(1968)根据大豆种皮存在的过氧化物酶活性有高或低的差异，把大豆栽培品种分为两个组群。Buttery和Buzzell(1969)也从遗传研究证明，种皮过氧化物酶活性是受一个主基因控制的。他们发现，显性等位基因的存在，则种皮具有高的过氧化物酶活性，而纯合隐性等位基因存在，则表现为低活性。

据Payne(1976)试验表明，种皮过氧化物酶测定结果不受种子品质或贮藏条件的影响。经美国农业部AMS种子标准局的仲裁检验确认，大豆种皮过氧化物酶测定结果在不同检验室具有良好的重演性。

现在该法已被许多种子检验室所采用，用于鉴认种子批标签所标明品种的正确性和混合种子样品的鉴定。

2．测定程序

(1)从大豆种子剥下种皮，分别放入试管，每个种皮放1支试管，然后分别注入1ml蒸馏水，浸提1小时。

(2)每个试管加入10滴0．5%愈创木酚(guaia-Col)溶液。

(3)待10分钟后，每支试管加入1滴0．1%过氧化氢(H₂O₂)溶液。

(4)在加入过氧化氢1分钟后，计数试管的种子浸提液呈现红棕色的种子数(高过氧化物酶活性)，或者试管里种皮浸提液无色的种子数(低过氧化物酶活性)。

3．美国的实例

(1)过氧化物酶呈阳性反应(+)的品种有：“Corsoy”、“Forrest”、“Williams”；

(2)过氧化物酶呈阴性反应(－)的品种有：“Beeson”、“Bragg”、“Calland”；

(3)过氧化物酶呈阳性(+)和阴性(－)反应的品种：“Braxtan”、“Catter71”。

4．应注意事项 在采用这一种方法时，必须预先使用该法对本地区的有关大豆品种进行种皮的愈创木酚－过氧化物酶显色测定，预先确定各个大豆品种种皮过氧化物酶显色所呈现的颜色，并记录和绘出各品种的颜色图谱，才能采用该法进行种皮显色有差异品种的鉴定，以便获得有效的结果。

【参考文献】：

〔1〕西北农业大学编(1978)，作物育种学，P531－542，农业出版社。

〔2〕王金陵编(1957)，大豆品种纯度检验，黑龙江省农业厅种子处印。

〔3〕陶嘉龄(1981)，种子生理和种子标准，P15－20，浙江农业大学农学系种子教研组整理印刷。

〔4〕浙江省农科院育种栽培所着(1964)，农作物田间试验记载项目及试行标准，PP74－79，《浙江农业科学》编辑部。

〔5〕B．J．Cardy et al(1984)．Identification of Soybean Cultivars using isoenzyme electrophoresis，Seed Sci．& Technol，12：943－954。