海洋动物性饵料生物培养
出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《水产养殖手册》第694页（8026字）
一、轮虫(Rotafea)
轮虫是鱼、虾、蟹类等前期幼体的重要饵料种。当前，国内、外水产养殖业中所用的轮虫大多数指褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicalilis O．F．Muller)。褶皱臂尾轮虫分类上隶属轮虫纲(Rotatoria)，单巢目(Monogononta)，游泳亚目(Ploima)，臂尾轮虫科(Brachionidae)，臂尾轮虫属(Brachionus)。个体大小随地区和季节以及不同品系而有变化。一般体长为160—250μm，体宽(被甲最宽处)150—202μm，刚孵出的幼体长100μm，宽80μm，雄体不易见，比雌体小。
(一)生物学特性 褶皱臂尾轮虫广泛分布于世界大多数地区的半咸水和海水水域。我国沿海港湾均有分布。
1．盐度 在4—35‰的盐度中均能正常生殖，最合适的生殖盐度是20‰，生殖适盐范围15—25‰。
2．温度在5℃和40℃的温度范围内仍能正常生活和繁殖。最合适的生殖温度为25℃，但最大密度和最高产量是在30—35℃。对温度的要求因不同的品系而有差异。
3．饵料和食量 以25μm以下的浮游单胞藻类、细菌、微生物、微型原生动物和有机碎屑为食。饵料以扁藻(Platymonas sabcordiformis)、衣藻(Chlamydomonas)、微绿球藻(Nannochloris oculata)、小球藻(Chlorella sp．)、等鞭金藻(Ischry—sis galbana)等为好。酵母和微颗粒状的生、熟豆浆也可作饵料，但其浓度不易控制，效果不理想。轮虫有不停摄食的特点，食量大，故饵料液浓度应保持在6万—15万细胞／ml。
4。繁殖、寿命和死亡 轮虫雌雄异体，行孤雌生殖(单性生殖)。在适宜的温度、盐度和充足的饵料供应条件下，4—7月是轮虫的繁殖盛期。抱卵量一般3—6个，若维持富营养化水，可抱卵8个，偶有9个卵；水温15℃以下(10℃左右)时，很少有抱卵5个的。从初孵幼体→成体并带卵仅2—3天；初孵幼体→成体→带卵→孵出第二代约7天。轮虫大量培养，不限室内、室外，瓶养或池养，只要温度、盐度、饵料适宜，从接种到产量高峰(不受敌害污染)，其周期仅8—15天。在温度偏高的夏季，轮虫寿命偏短，且个体小型化，是筛选分离小型轮虫品系的理想季节。当温度低仅能维持生命的冬季，轮虫个体偏大，而寿命长于夏季，一般在7天左右。水温条件虽适，但如果饵料缺乏，一般3天左右即死亡。
(二)休眠卵形成、采收、贮存和应用 轮虫在饵料量不足，饵料质量差，水质恶化，轮虫密度过大等不良因素，或人为地抑制培养条件等情况下，均能迫使轮虫产生休眠卵。休眠卵一般出现在3、4月和9、10月间。休眠卵椭圆形，桔红色，卵径长约130μm，宽80μm，卵一端有空隙，卵壳厚，比重大，产后不孵化，沉于水底，与沉底的藻渣、碎屑、泥沙交混一起，经越冬到翌年春天，水温适宜，即自然孵化，人们习惯称冬卵。非休眠卵圆形、色绿、壳薄，产后即孵化。轮虫可连续数世代的孤雌生殖，一旦发现雄体，轮虫产量下降，数日难恢复，是培养轮虫生产的一大关键。因此，大量培养轮虫时，应经常镜检轮虫生长情况，取底部沉淀藻渣碎屑，发现休眠卵，少则镜下挑出，多则连同碎屑在低温2—3℃或-4℃左右贮存。用时，取出放入盐度20—30‰海水中，水温15℃左右，3天后即相继孵化。
轮虫贮存保种的方法：
①冰冻贮存；②低温贮存；③冷冻贮存；④休眠卵贮存。
(三)培养 在实验室可常年保种培养轮虫，并相应培养单细胞藻种，随之再次培养或扩大。
1．清池 室内、外水泥池或土池大量培养轮虫，需清池(视新、老池)。清池一般用的药物：漂白粉用量为50ppm；敌百虫(含量为90%)，以10ppm有效。鱼藤精、敌百虫限用于老池且发现有鱼的水体。
2．施肥 有机肥或无机肥均可，或用煮熟后的臭鱼、烂虾、蛤蜊汤汁泼洒入池，开始少施，以勤施少量，保持水色淡绿或淡褐、棕褐为好，透明度约为20—30cm。
3．接种 若以1个／100ml的比例，水温15—20℃，盐度20‰左右，微型浮游性单细胞藻的密度约10万—15万细胞／m1，在0．5亩到1亩，水深50cm的土池中，20天左右，轮虫产量达100—150个／m1。
轮虫培养的方法：
①一次性养殖；②半连续性养殖；③反馈养殖系统。
轮虫在海洋鱼类(牙鲆、真鲷、黑鲷及梭鱼)人工育苗阶段的饵料系列中，是重要的饵料环节。因轮虫所含不饱和脂肪酸(HUFA)为20∶5ω3、22∶6ω3、18∶3ω3。若ω3族的含量在0．3—0．5%以下则会使仔鱼的成活率低，健康不良，出现畸形等不良症状。
我国当前采用的仔、稚、幼鱼的饵料系列是：牡蛎幼体→轮虫→卤虫→鱼、虾肉糜→人工饵料。
近年日本不用牡蛎幼体，直接采用轮虫→卤虫→碎鱼肉→人工饵料。
二、卤虫(Brine shrimp)
卤虫(Artemia)属节肢动物门(Arthropoda)，有鳃亚门(Branohiata)，甲壳纲(Crustacea)，鳃足亚纲(Branchiopoda)，无甲目(Anostraca)，盐水丰年虫科(Branchinee tidae)，俗称盐虫子。卤虫初孵幼体具多量的卵黄，以干重计，含蛋白质约60%，脂肪约20%；成体含蛋白质57．62%，脂肪18．11%，灰分19．05%，碳水化合物5．22%。当前，世界海水动物养殖，已有85%以上是利用卤虫作为活饵料来源。
(一)生物学特征
1．生态分布 卤虫广泛分布于欧、亚、美洲各不同的碳酸盐和硫酸盐湖水域，以及沿海盐田的卤水中。我国则以辽宁、河北、山东沿岸的盐田盛产。台湾也有，福建、广东、海南岛也偶有发现，近年，内蒙及山西运城亦发现卤虫，并已在开发中。
卤虫可在盐度10—247‰，甚至在高达300‰的高盐水域中生存。它能在低氧条件下生活，含氧量在1—2mg／L卤虫呈红色；在0．3—0．5mg／L呈疲惫不活跃状态；在0．1—0．29mg／L时是其致死临界。适温范围25—27℃，在大水体中可在-3—42℃之间生活。卤虫冰冻期短，冰融后仍能复活。初孵幼体在近岸集群，密度每立方米可达几十万只，一般为4万—5万只／m3；成体密度大呈带状分布，幼体在水面，成体可分布表层150cm水层中。
2．生殖 卤虫两性生殖，但以孤雌生殖为主。可卵生，也可胎生，均与温度、盐度、饵料有关。一般在夏季多行胎生，夏末秋初则由胎生过渡到卵生，产生休眠卵。休眠卵壳厚，色由灰白到棕褐，此卵可干燥贮存，在自然条件下能越冬。
卤虫的生殖周期和寿命，根据作者近年的研究，从初生幼体到成体抱卵48天，从抱卵到生出幼体54天左右，温度高的夏季仅15天左右。每尾成体可产幼体176．8—363．6尾，最高达544．2尾。平均每尾每天可产出幼体16．35—22．73尾；一尾成体可连续生殖45天。一尾个体从生到死，它的寿命约为158天，国外报道活6个月。上述资料，均与培养条件下的饵料、温度、培养管理有关。
3．食性和饵料 卤虫为滤食性，以细菌、微生物及单细胞藻类为主要食物，也可以微型颗粒状的米糠等为饵。
4．生长发育 由初孵幼体到成体共经15次蜕皮，每蜕皮一次为1龄期。每次蜕皮历时约1—15h，初期幼体2—3昼夜蜕皮一次。成体在繁殖时蜕皮。卤虫在性成熟期生长最快，日生长量在0．1mm左右，衰老期生长下降或停止生长。低盐度(48‰)生长最快，高盐度(190‰)生长最慢。
(二)卤虫卵的采收、加工和贮存 我国北方多在秋后以200目的手操网，在盐池的逆风处采。风大浪急，卵被吹到池岸缝隙，雨后又冲入池或与泥沙交混沉入池底。因此，既可用网在水面上捞取浮卵，也可用铁铲铲取泥沙后经筛淘得卵。
卤虫卵采收后(包括收购质量差的卵)处理、加工、贮存的简易流程：
(三)卤虫卵孵化和应用(工艺流程示意) 称干卵(3—5g／L水)→充气淘洗去污(30min)→卵移入200ppm福尔马林浸泡30min(或30ppm的次氯酸钠溶液浸5min)→滤出卵，用新鲜海水冲洗至无味→卵移入孵化桶(圆锥形桶为好)→加水(保持3kg／m3)→充气(保持卵上、下翻滚)→控温25—30℃→孵化桶上30cm处加20W日光灯(1—3000lx)→pH(8—9)→24—48h→孵化桶加黑布遮光(夜间关灯)→停止充气10min→随之打开水下灯光→出水孔系好收集幼体用的网袋→打开出水阀门→快速分离出幼体→将幼体转入盛有新鲜海水的桶中→充气→投喂时用新鲜海水冲洗幼体后用→投喂(鱼、虾、蟹幼体)无节幼体的量(3—5个虫／ml)。
(四)卤虫卵质量检查 卤虫卵由于采收、加工、贮存的方法不同，均影响其孵化率的高低。为此，提出下列检查虫卵质量的简易法。
1．购买卤虫卵时，要问明卵子采收年限(以当年者好)；是否加工(以淘洗去污干燥冷冻者好)。
2．用鼻嗅卵，有无发霉的腥臭味(一般腥气而无刺鼻的烈臭为好)。
3．目测虫卵色泽，以棕褐色、干燥、纯洁者好。
4．用玻片挤压法(或指甲压卵法) 将卵放两玻片间挤压后无液体出现者，不好。
5．用手握卵，呈团状，则含水量大，不好；若不潮湿但杂质、泥土多，也不好。
6．镜下检查的卵虽凹陷干瘪但无破裂状，仍属好卵。
7．孵化 取一定量的卵，放透明玻璃杯内，在25—30℃水温下，经48h计算其孵化率。水温低可延长5天左右才孵化。如果无海水，可用1000ml淡水加粗盐30g备制。我国卵一般孵化率在30%以上，加工处理的卵孵化率可达50%以上。
(五)卤虫卵去壳及应用 卤虫休眠卵表层硬壳的主要成分是脂蛋白和正铁血红素，易溶于次氯酸盐，卵壳内的卵黄外还有一层透明的薄膜保护，故其胚胎的活力不受影响。为达到去壳目的，需合理的配制去壳溶液。
1．去壳溶液配制及浓度计算：
(1)去壳液的配制：次氯酸钠溶液，液态次氯酸钙和漂白粉均可作去壳原料。
配制去壳溶液必须考虑以下三个条件：
①去壳液的总量(次氯酸盐用量加海水用量)应满足13ml／g卵；
②用次氯酸盐的量，是按2g卵／每克有效氯含量；
⑧用次氯酸钙，则按1gNa4CO3／克卵；用次氯酸钠，则按0．13gNaOH／克卵。
根据上述三个条件，即可计算出一定量的卵所需配制的去壳液数量及浓度。
(2)计算方法：用含氯量为13%的次氯酸钠溶液，配10g卤虫卵的去壳液。按上述①：13ml／g卵；即10g卵=130ml(总量)。按②：2g卵／g有效氯；即10g卵=10／2=5g(有效氯)。按③：已知次氯酸钠含氯量为13%，依比例式：100∶13=X∶5
从10g卤虫卵所需的130ml总量中-38ml的次氯酸钠量=92ml(为海水量)
按③：用NaOH的量为0。13g／g卵
即：0．13×10g卵=1．3g(NaOH)
综上所述：则92ml海水加入1．3gNaOH，再加13%的次氯酸钠溶液38ml，就配成了10g卤虫卵所需的去壳溶液剂量。
用次氯酸钙作去壳液的计算见表42—1。
表42—1 用次氯酸钙作去壳液计算剂量与卤虫卵比例
用其他去壳原料，依含氯量不同，计算方法类推。用去壳原料前，必须先测知含氯量。若用粉状漂白粉做去壳原料，用前先将漂白粉放海水中浸泡、搅拌，使其溶解，再加碳酸钠，再搅拌片刻，静置数分钟，滤去不能溶解的沉淀再用。
2．卵去壳前后的处理和操作
(1)卵淘洗和去壳：根据去壳溶液的剂量，称取一定量的卵，放入海水或淡水中充气搅拌去污，约30min左右。凹陷卵恢复圆状。滤出好卵，投放去壳溶液中，充分搅拌均匀，去壳速度依温度而有变化。
(2)卵去壳过程的变化；卵在去壳过程中，卵的颜色由咖啡色逐渐变为灰褐色，再到白色，瞬间卵即呈桔红色，去壳完成。
注意事项：①控制水温在40℃以内；②完成去壳后立即用水冲洗，去其溶解的壳膜；③去壳时间不宜拖长，一旦去壳过度，则卵粘连呈絮状，此卵不能再孵化，卵内营养也受破坏。
(3)去壳卵清洗去氯：将刚去壳后的卵放入1—2%的硫代硫酸钠(Na2S2O3)溶液中(5—10ml／g卵)去氯。或加0．1N(0．1mol／L)浓度的盐酸液(37%浓盐酸8．2ml加91．8ml蒸馏水)若干滴去氯。
(4)测试去氯效果：取少量卵于0．1N浓度的碘化钾(0．1N(0．1mol／L)浓度的碘化钾溶液配制：取16．6g碘化钾溶于1L蒸馏水中)中，加1—2滴可溶性的淀粉溶液，以是否出现蓝色，示去氯是否完全。
Cl2+2KI=2KCl+I2(加淀粉液呈蓝色)
3．去壳卵的贮存、孵化和投喂 去壳卵可贮存备用。贮存方法：①饱和食盐水浸泡数分钟，滤出转换一次饱和食盐水浸泡，反复2—3次。最后以超出去壳卵量2—10cm的深度贮存；②直接将去壳卵放在低温或冰冻(4—-4℃)贮存；③将去壳卵滤水后风干装瓶贮存。用以上方法长期贮存，孵化率可能有降低，但作饵料，仍效果较好。
去壳卵可孵化后投喂。卵去壳后其孵化率提高，孵化速度也略快。这与卵去壳时的温度，去壳时间长短以及卤虫卵的不同品系有关。
去壳卵也可直接投喂，作为鱼、虾、蟹类的幼体的饵料。但由于卵去壳后失去浮力，易粘连下沉呈团，故应在充气条件下投喂，否则，不易被幼体所获得。
尤应注意，经饱和盐水贮存的去壳卵，用前应以淡水冲洗，淡化后再投喂。
(六)卤虫增养殖和在盐业生产中的作用
1．引种繁殖 在没有卤虫资源的国家和地区，可从其他国家引进卤虫的优良品系，接种到适于繁殖生长的盐湖或盐田中。采用一次生引种或称永久性引种，如巴西东北部的马口盐场(Macau)就是将美国旧金山湾卤虫的无节幼体引种移养成功。也有用暂时性的引种移养，如菲律宾、泰国等地区，曾将500g卤虫卵所孵出的幼体接种到1ha的盐田池中，每月可收获1000—1500kg鲜卤虫和15—20kg卤虫卵。
卤虫卵去壳工艺流程
2．室外土池或水泥池培养卤虫 是采用清池、施肥和半投饵的常规人工养殖法。国外在卤虫生殖的集中季节，有收鲜卤虫40kg／ha／天，以及收卤虫卵0．6kg／ha／天的记录。我国养卤虫每亩产量约在125—200kg的水平。
3．集约式养殖卤虫 即在不换水的环道批次养殖。不换水，但保持水质平衡，需要人工供饵，平均产量可达5kg湿重／m3。也有用流水连续更新水质，高密度养殖卤虫的方法，其接种量为2万个无节幼体／升水，水温25℃时在2周内产量可达25kg(湿重)／m3。
据近年报道，全世界已有40多个国家500个以上的地区发现有卤虫，除用于水产动物养殖中的饵料外，并用于盐田生物管理的生态系统，以提高盐质盐量。
建立盐田生物系统的平衡，首先应考虑在初级蒸发盐池富有各种生产力高的微小生物群落，继而在中级蒸发池有相应数量的浮游单胞藻类和卤虫，在高级蒸发池应有大量的红色嗜盐菌类。
卤虫即起滤食净化的作用，死亡老化的藻渣沉于池底，形成藻垫防止渗透，提高盐量。绿色单细胞藻和有机碎屑，被卤虫所摄食，净化了水质，提高了盐的纯洁度，而卤虫死后又繁殖了红色嗜盐菌类，从而提高了盐产量。这个模式，是国际盐田生物管理的权威戴维斯(Davis)所提出，是有价值的生态平衡系统，已受盐业生产的重视。
(编者：郑严、李诺、赖伟 审者：李德尚、李诺、郑严)