(5)棉籽、植株和土壤中残留量检测方法(方法一)
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第145页(2095字)
农业部农业环境质量监督检验测试中心(济南) 孙桂兰 阚建军 许志强 武玉奎
土壤用二氯甲烷提取,植株、棉籽用甲醇提取,液-液分配,SPE-C18柱净化,液相色谱法(UV)测定。
1.主要仪器及设备
高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)
旋转蒸发器
水浴振荡器
超声波清洗器
2.主要试剂
乙腈(色谱纯)、石油醚(60~90℃)、二氯甲烷、乙酸乙酯(重蒸馏)、浓盐酸、二次重蒸水、氯化钠、无水硫酸钠
SPE-C18柱 500mg/5mL
吡虫啉标准品
3.检测步骤
3.1 提取
3.1.1 土壤
称取20g过40目筛的风干土样,置于500mL平底三角烧瓶中,用50mL、40mL、30mL二氯甲烷超声波提取(分别为15min、10min、5min)3次。合并提取液,用旋转蒸发器(50℃)浓缩至3~4mL,氮气吹干,用流动相定容5mL,待测。
3.1.2 棉籽、棉株
称取10g脱绒后粉碎的棉籽或切碎的植株,置于500mL平底三角烧瓶中,加120mL甲醇/水(3∶1,V/V),浸泡1h(植株样本另需组织捣碎2min并用30mL甲醇/水冲洗容器),振荡提取30min,过滤。滤渣再用80mL甲醇振荡30min,过滤。
3.2 净化
3.2.1 液-液分配
合并滤液于500mL分液漏斗中,加入100mL5%氯化钠溶液,用100mL石油醚,振摇洗涤。收集水相于另一分液漏斗中。石油醚相用5%氯化钠溶液50mL反萃取1次,弃去石油醚相。合并水相,加入0.5mL6mol/L盐酸,用50mL、50mL、25mL二氯甲烷萃取,合并二氯甲烷相,用无水硫酸钠脱水,用旋转蒸发器减压浓缩至近干,再用氮气吹干,待柱净化。
3.2.2 柱净化
取SPE-C18柱,用10mL甲醇预淋,至干,再用二次重蒸水预淋,至干。样本用10mL石油醚/乙酸乙酯(9∶1,V/V)溶解,分3次转到柱中,淋出液弃去。用石油醚/乙酸乙酯混合液(3∶7,V/V)洗脱,收集10mL洗脱液,用氮气吹至近干,用甲醇定容至10mL,待测。
3.3 液相色谱法测定
检测器 UV
波长 270nm
色谱柱 Agilent Extend-C18,250mm×4.6mm×5μm
流动相 乙腈/水(40∶60,V/V)
流速 1.0mL/min
进样量 20μL
保留时间 4.0min
4.结果计算
外标(峰高)-标准曲线法定量
5.灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 1.1×10-9g。
最低检测浓度 棉籽和植株均为0.03mg/kg,土壤0.01mg/kg。
回收率 棉籽、植株和土壤中添加吡虫啉0.05~1.00mg/kg时,平均回收率分别为82.5%~91.4%、80.7%~88.2%和85.4%~92.0%。见表1-21-8。
相对标准偏差 3.3%~6.8%,见表1-21-8。
表1-21-8 棉花和土壤中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果