糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第460页（3238字）

浙江大学农药与环境毒理研究所 朱国念、赵莉、吴慧明

样本用甲醇提取，经柱层析净化后用液相色谱法(DAD)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 二极管阵列检测器(DAD)

国际型振荡器

旋转蒸发器

稻谷出糙机

层析柱 Φ10mm×200mm

2．主要试剂

乙腈(HPLC级)、甲醇(HPLC级)、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸、盐酸、无水硫酸钠

硅胶、弗罗里硅土、酸性氧化铝均为100～200目

氰氟草酯标准品、代谢物标准品

3．检测步骤

3．1 提取与液-液分配

3．1．1 田水

取100mL经过滤的田水于500mL分液漏斗中，加适量1mol／L调节pH至2～3。用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，浓缩至干，用甲醇定容，待测。

3．1．2 糙米、稻壳

称取10g样本于三角瓶中，加入20mL 1mol／L盐酸和50mL甲醇，振荡提取1h，抽滤，用20mL甲醇洗残渣。合并滤液于500mL分液漏斗中，加150mL6%氯化钠溶液，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，浓缩，待柱层析净化。

3．1．3 土壤、植株(稻苗和稻秆)

称取20g土样(植株剪碎取10g)于三角瓶中，加入20mL1mol／L盐酸和80mL甲醇，振荡提取1h，抽滤，用20mL甲醇洗残渣。合并滤液于500mL分液漏斗中，加150mL6%氯化钠溶液，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，浓缩至1～2mL，待柱层析净化。

3．2 柱层析净化

3．2．1 糙米、稻壳、植株(稻苗和稻秆)

在层析柱中依次装入1cm无水硫酸钠、2．5g酸性氧化铝、2．5g弗罗里硅土以及1cm无水硫酸钠，并先后用30mL混合液(乙酸／甲醇／乙酸乙酯)和20mL甲醇预淋。将上述样品浓缩液移至柱中，用30mL甲醇洗脱氰氟草酯及DP(酚)，收集全部洗脱液，浓缩(水浴60℃)至近干，用甲醇定容，待测。再用10mL甲醇和20mL乙酸乙酯依次淋洗柱子，并弃去。用70mL乙酸／甲醇／乙酸乙酯(1∶10∶90，V／V／V)洗脱一酸(ACID)，收集洗脱液并浓缩(70℃)至近干，用甲醇定容，待测。

3．2．2 土壤

用30mL乙酸／甲醇／二氯甲烷(1∶10∶90，V／V／V)湿法装柱将5g硅胶均匀装入层析柱中，再用20mL甲醇预淋。将上述样本浓缩液移入柱中，再用50mL乙酸／甲醇／二氯甲烷(1∶10∶90，V／V／V)洗涤烧瓶并转入柱中进行洗脱，收集洗脱液并浓缩(水浴温60℃)至近干，用甲醇定容，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 DAD

检测波长 248nm

流动相组分 A磷酸／水(0．2／100，V／V) B乙腈 C甲醇

流速 0．9mL／min

梯度洗脱 0min，A∶B∶C=60∶25∶15

3．0min，A∶B∶C=50∶50∶0

4．0min，A∶B∶C=40∶30∶30

5．0min，A∶B∶C=30∶35∶35

7．0min，A∶B∶C=20∶80∶0

进样量 20μL

保留时间 AMIDE(酰胺) 7．0min

DIACID(二酸) 8．1min

DP(酚) 9．7min

ACID(一酸) 10．1min

氰氟草酯 14．3min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 见表3-14-1。

最低检测浓度 见表3-14-1。

表3-14-1 氰氟草酯及其代谢产物的HPLC检测限

回收率 糙米、稻壳、稻秆、土壤和田水中添加氰氟草酯及其代谢产物0．01～5．0mg／kg，平均回收率为80．2%～103．8%。见表3-14-2～6。

相对标准偏差 0．1%～8．8%，见表3-14-2～6。

表3-14-2 糙米、稻壳、稻秆、土壤和田水中氰氟草酯添加回收率及相对标准偏差实验结果

表3-14-3 糙米、稻壳、稻秆、土壤和田水中ACID添加回收率及相对标准偏差实验结果

表3-14-4 土壤、田水中DIACID添加回收率及相对标准偏差实验结果

表3-14-5 土壤、田水中AMIDE添加回收率及相对标准偏差实验结果

表3-14-6 糙米、稻壳、稻秆中DP添加回收率及相对标准偏差实验结果

6．糙米、稻壳、植株、土壤和田水中氰氟草酯及其代谢产物液相色谱测定谱图

见图3-14-1。

图3-14-1 糙米、稻壳、植株、土壤和田水中氰氟草酯及其代谢产物液相色谱测定谱图