食品中钙的测定方法

出处：按学科分类—工业技术 中国轻工业出版社《食品添加剂分析检验手册》第190页（19133字）

一、葡萄糖酸钙

化学名：葡萄糖酸钙(Calcium gluconate)

结构式：

分子式：C₁₂H₂₂O₁₄Ca·H₂O

相对分子质量：448．39(一水物)，430．38(无水物)

(一)葡萄糖酸钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 冰乙酸(GB1628)。

1．2 苯肼：新蒸馏的试剂。

1．3 三氯化铁溶液：取三氯化铁9g，加水使溶解成100mL，即得。

2．操作步骤

2．1 取本品1g，加水40mL使之溶解，取此溶液按《中华人民共和国药典》1990年版，二部中附录39页检验应显钙盐的鉴别反应。

2．2 取本品0．5g，置试管中，加水5mL，微热溶解后，加冰乙酸0．7mL与新蒸馏的苯肼1mL，置水浴上加热30min后，放至室温，用玻璃棒摩擦试管的内壁，渐生成黄色的结晶。

2．3 取本品0．1g，加水5mL溶解后，加三氯化铁试液1滴，显深黄色。

(二)葡萄糖酸钙含量的测定

1．试剂和溶液

1．1 氢氧化钠(GB629)：1mol／LNaOH溶液。

1．2 乙二胺四乙酸二钠(GB1401)：0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液。

1．3 钙紫红素指示剂：取钙紫红素0．1g，加无水硫酸钠10g，研磨均匀。

2．测定方法

取本品0．5g，精密称定(准确到0．0001g)，加水100mL，微热使溶解，放至室温，加氢氧化钠溶液15mL与钙紫红素指示剂0．1g，用0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至溶液由紫色转变为纯蓝色。

3．分析结果的表述

葡萄糖酸钙含量(w)以质量分数计，按式(9－9)计算：

式中 V——乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液的体积，mL

c——乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液的实际浓度，mol／L

m——样品的质量，g

0．4484——与1．00mL乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液〔c(EDTA)=1．000mol／L〕相当的以克表示的葡萄糖酸钙的质量

所得结果取两次平行测定的算术平均值，保留小数点后的2位数字。

4．允许差

两次平行测定的结果相对偏差不大于0．3%。

二、磷酸氢钙

化学名：磷酸氢钙(Calcium monohydrogen phosphate)

结构式

分子式：CaHPO₄·2H₂O

相对分子质量：172．10(二水物)

(一)磷酸氢钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 硝酸银(GB670)：50g／L溶液。

1．2 冰乙酸(GB676)。

1．3 草酸铵(HG3－976)：30g／L溶液。

2．操作步骤

2．1 试样用硝酸银溶液湿润后即呈黄色。

2．2 0．1g试样，加5mL冰乙酸，煮沸冷却后过滤，滤液加5mL草酸铵溶液，产生白色沉淀。

(二)磷酸氢钙的含量测定

方法提要：在试验溶液中，加入过量的乙二胺四乙酸二钠溶液，与钙络合，以酸性铬蓝K－萘酚绿B为指示剂，用锌标准溶液滴定过量的乙二胺四乙酸二钠。

1．试剂和溶液

1．1 盐酸 (1+4)溶液。

1．2 氨－氯化铵缓冲溶液，pH10。

1．3 酸性铬兰K－萘酚绿B混合指示液(KB指示液) 称取0．3g酸性铬蓝K和0．1g萘酚绿B，溶解于水中，稀释至100mL。

1．4 铬黑T 5g／L指示液。

1．5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA) 约0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液。

1．6 硫酸锌 c(ZnSO₄)约0．05mol／L(ZnSO₄)标准滴定溶液。称取14g硫酸锌，溶于1000mL水，摇匀。

标定：量取35mL配制好的硫酸锌溶液，加70mL水及10mL氨－氯化铵缓冲溶液，加5滴铬黑T指示液，用EDTA标准滴定溶液滴定至溶液由紫红变为纯蓝色。同时作比对试验。

硫酸锌标准滴定溶液的浓度c(ZnSO₄)按式(9－10)计算：

式中 V₁——滴定消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL

V₂——比对试验消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL

c₁——EDTA标准滴定溶液的浓度，mol／L

V——硫酸锌溶液的体积，mL

2．操作步骤

称取0．4g试样，精确至0．0002g，置于100mL烧杯中，加12mL盐酸溶解，移入250mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。用移液管移取25mL试验溶液置于300mL锥形瓶中，加25．00mLEDTA标准滴定溶液，加50mL水、10mL氨－氯化铵缓冲溶液，放置5min，加4滴KB指示液，用硫酸锌标准滴定溶液滴定至溶液由蓝变为紫色，30s紫色不褪即为终点。

同时作比对试验。

3．分析结果的表述

磷酸氢钙(CaHPO₄·2H₂O)质量分数(w)按式(9－11)计算：

式中 V₀——比对试验所消耗的硫酸锌标准滴定溶液的体积，mL

V——试验溶液所消耗的硫酸锌标准滴定溶液的体积，mL

c——ZnSO₄标准滴定溶液的实际浓度，mol／L

m——试样的质量，g

0．1721——每毫摩CaHPO₄的质量，g／mmol

所得结果应表示至1位小数。

4．允许差

两次平行测定结果之差不大于0．3%，取其算术平均值为测定结果。

三、磷酸二氢钙

化学名：磷酸二氢钙(Calcium Phosphate Monobasic)

分子式：Ca(H₂PO₄)₂·H₂O

相对分子质量：252．07

(－)磷酸二氢钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 硝酸银：10g／L溶液。

1．2 草酸铵：3g／L溶液。

1．3 盐酸：(1+1)溶液。

1．4 硝酸：(1+14)溶液。

2．操作步骤

2．1 钙离子 称量约0．1g试样，溶于2mL盐酸(1．1．3)及20mL水中，溶解后加5mL草酸铵溶液(1．1．2)有白色沉淀生成。

2．2 磷酸根离子 称取少量试样，用硝酸溶液(1．1．4)溶解后，滴加硝酸银溶液(1．1．1)，有黄色沉淀生成。

(二)磷酸二氢钙含量测定

1．原理

在试样溶液中，加入过量的乙二胺四乙酸二钠溶液，与Ca²⁺络合，以酸性铬蓝K－萘酚绿B为指示剂，用锌标准溶液滴定过量的乙二胺四乙酸二钠。

2．试剂和溶液

2．1 乙二胺四乙酸二钠 0．05mol／LEDTA标准溶液。

2．2 硫酸锌约0．05mol／L(1／2ZnSO₄)标准溶液。

2．3 氨水。

2．4 氯化铵。

2．5 氨－氯化铵缓冲溶液：pH10。

2．6 酸性络蓝K－萘酚绿B混合指示剂(KB混合指示剂)。

配制：称取0．3g酸性络蓝K和0．1g的萘酚绿B，溶解于水中，稀释至100mL。

2．7 盐酸 (1+1)溶液。

3．空白试验

用移液管移取25mLEDTA标准溶液(2．1)置于500mL锥形瓶中，加50mL水，10mL氨－氯化铵缓冲溶液(2．5)，放置5min，加4滴KB混合指示剂(2．6)，用硫酸锌标准溶液(2．2)滴定至溶液由蓝变为紫色，30s内紫色不褪即为终点。

硫酸锌标准溶液的浓度c₂按式(9－12)计算：

式中 V₁——EDTA标准溶液的体积，mL

c₁——EDTA标准溶液的浓度，mol／L

V₂——滴定中消耗的硫酸锌标准溶液的体积，mL

4．测定方法

称量约0．8g试样，精确到0．0002g，置于100mL烧杯中，加少量水润湿，加8mL盐酸溶液(2．7)溶解，移入250mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。用移液管移取25mL试液置于500mL锥形瓶中，再移取25mLEDTA标准溶液(2．1)，加50mL水，加10mL氨－氯化铵缓冲溶液(2．5)，放置5min，加4滴KB混合指示剂(2．6)，用硫酸锌标准溶液(2．2)滴定至溶液由蓝变为紫色，30s内紫色不褪即为终点。

5．分析结果的表述

以质量分数表示的磷酸二氢钙含量(以Ca计)(w)按式(9－13)计算：

式中 V₁——加入的EDTA标准溶液的体积，mL

c₁——EDTA标准溶液的浓度，mol／L

V₂——滴定中消耗硫酸锌标准溶液的体积，mL

c₂——ZnSO₄标准溶液的浓度，mol／L

m——试样的质量，g

0．04008——每毫摩Ca²⁺质量，g／mmol

两次平行测定结果之差不大于0．2%，取其算术平均值为测定结果。

四、乙酸钙

化学名：乙酸钙(Calcium Acetate)

结构式

分子式：C₄H₆O₄Ca

相对分子质量：158．17(无水物)，176．18(一水物)

(一)乙酸钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 盐酸(GB622)。

1．2 硫酸(GB625)。

1．3 三氯化铁(HG3－1085)。

1．4 草酸铵(HG3－976) 4%溶液。

1．5 样品溶液的制备 称取样品0．1g，加20mL水溶解，即得。

2．操作步骤

2．1 取样品溶液(1．1．5)2mL，加草酸铵试液1滴，即生成白色沉淀。

2．2 取铂丝，用盐酸润湿，先在无色火焰上烧至无色，然后蘸取样品溶液(1．1．5)，在无色火焰上燃烧，火焰呈砖红色。

2．3 取样品0．2g，加硫酸0．5mL，加热，即发生乙酸的特臭。

2．4 取样品溶液(1．1．5)2mL，滴加三氯化铁试液1滴，溶液呈深红色，加稀盐酸，红色即褪去。

(二)乙酸钙含量测定

1．原理

样品中加入三乙醇胺溶液将Fe³⁺、Al³+、Mn²⁺等离子掩蔽起来，加入氢氧化钠试液，使溶液pH大于12，Mg²⁺则形成Mg(OH)₂沉淀，排除干扰后，在此碱性溶液中，加入钙紫红素指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准滴定液滴定钙离子。

反应式如下：Ca²⁺+H₂Y^2－→CaY^2－+2H⁺试

2．试剂和溶液

2．1 氢氧化钠(GB629)。

2．2 三乙醇胺(化学纯) 20%溶液。

2．3 乙二胺四乙酸二钠(GB1401) 0．05mol／L标准滴定溶液。

2．4 钙紫红素。

3．测定方法

称取样品约0．2g，准确至0．0002g，加水100mL溶解后，加入三乙醇胺试液5mL，氢氧化钠试液15mL，钙紫红素指示剂约0．1g，然后用0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液滴定至溶液由红色变为纯蓝色即得。

4．分析结果的表述

乙酸钙含量以质量百分数(w₁)表示，按式(9－14)计算：

式中 w——乙酸钙含量的质量分数，%

V——乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液体积，mL

c——乙二胺四乙酸二钠滴定溶液的实际浓度，mol／L

m——样品的质量，g

w₁——水分的质量分数，%

0．1582－每毫摩C₄H₆O₄Ca质量，g／mmol

所得结果取两次平行测定的算术平均值，保留4位有效数字。

注：水分测定：称取样品约0．2g，准确至0．0002g，按《中华人民共和国药典》1990年版二部附录55页费休氏法测定。

5．允许差

两次平行测定结果的相对偏差不超过0．3%。

五、活性钙

化学名：活性钙(Active Calcium)

别名：活性钙离子

化学结构：本品所含钙的主要成分为氢氧化钙(约98%)，另含微量氧化镁(MgO)、氧化钾(K₂O)、三氧化二铁(Fe₂O₃)、五氧化二磷(P₂O₅)、氧化钠(Na₂O)和锰离子。

六、丙酸钙

化学名：丙酸钙(Calcium propionate)

结构式

分子式：(CH₃CH₂COO)₂Ca·(0～1)H₂O

相对分子质量：186．22(无水盐)

(一)丙酸钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 硫酸 (5．7+100，体积分数)溶液。

1．2 草酸铵 4%溶液。

1．3 盐酸。

1．4 冰乙酸。

2．操作步骤

2．1 丙酸 称取0．5g样品，溶于50mL水，加5mL硫酸(1．1)，加热，应有特殊臭味产生。

2．2 钙 称取0．5g样品，溶于50mL水，加草酸铵溶液(1．2)，即发生白色沉淀，能溶于盐酸(1．3)，不溶于乙酸(1．4)。

(二)丙酸钙含量测定

1．试剂和溶液

1．1 乙二胺四乙酸二钠 0．05mol／L标准溶液，按GB－601规定配制。

1．2 氢氧化钠 10%溶液。

1．3 钙试剂羧酸钠。

1．4 硫酸钾。

1．5 钙试剂羧酸钠指示剂 称取0．5g钙试剂羧酸钠，加50g硫酸钾混匀。

2．测定方法

样品在120℃干燥失重后，称取1g样品，准确至0．0002g，溶于水，移入100mL容量瓶中，稀释至刻度。量取25．00mL，加75mL水，用0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准溶液(1．1．1)滴定至近终点，加15mL氢氧化钠溶液(1．1．2)，放置1min。加0．1g钙试剂羧酸钠指示剂(1．1．5)，以0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准溶液(1．1．1)继续滴定至溶液红色消失呈现蓝色。

3．分析结果的表述

丙酸钙质量含量(w)按式(9－15)计算。

式中 V——乙二胺四乙酸二钠标准溶液用量，mL

c——乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度，mol／L

m——样品质量，g

0．1862——每毫摩(CH₃CH₂COO)₂Ca的质量，g／mmol

两次测定结果之差不得大于0．2%，取其算术平均值。

七、柠檬酸钙

化学名：柠檬酸钙(Calcium Citrate)

结构式：

分子式：C₁₂H₁₀O₁₄Ca₃·4H₂O

相对分子质量：570．50

柠檬酸钙鉴别

1．试剂和溶液

1．1 柠檬酸钙。

1．2 硝酸。

2．操作步骤

2．1 取本品在300～400℃灼烧1h，所得残渣呈钙盐反应(见磷酸三钙)。

2．2 取0．5g本品溶于10mL水和2．5mL稀硝酸(1+9)中，溶液呈柠檬酸盐反应(见柠檬酸钠)。

八、乳酸钙

化学名：乳酸钙(Calcium lactate)

结构式

分子式：C₆H₁₀O₆Ca·XH₂O

相对分子质量：218：22(无水物)

(一)乳酸钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 高锰酸钾(GB643) 0．1mol／L(KMnO₄)溶液。

1．2 草酸铵(HG3－976) 4%溶液。

1．3 硫酸(GB625)。

2．操作步骤

于一份样品溶液中，滴加硫酸使呈酸性，加适量0．1mol／L(KMnO₄)，加热，即发生乙醛的特殊臭味。于另一份样品溶液中，滴加4%草酸铵溶液，即发生白色沉淀，能溶于盐酸，不溶于乙酸。

(二)乳酸钙含量测定

1．试剂和溶液

1．1 乙二胺四乙酸二钠 0．05mol／L标准溶液，按GB601配制和标定。

1．2 氢氧化钠 10%溶液。

1．3 钙混合指示剂 0．1g钙试剂羧酸钠盐和20g于110℃干燥过的氯化钠(GB1266)混合研磨。

2．测定方法

称取干燥失重后样品0．3g，精确至0．0002g，先滴加25mL0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准溶液，加5mL10%氢氧化钠溶液，0．1g钙混合指示剂，继续用0．05mol／L乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至蓝色。

3．分析结果的表述

乳酸钙的质量分数(w)按式(9－16)计算。

式中 V——乙二胺四乙酸二钠标准溶液用量，mL

c——乙二胺四乙酸二钠标准溶液浓度，mol／L

m——样品质量，g

0．2182——每毫摩C₆H_1oCaO₆的质量，g／mmol

九、碳酸钙

化学名：碳酸钙(Calcium carbonate)

分子式：CaCO₃

相对分子质量：100．09

(一)碳酸钙的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 氢氧化钙 0．3%溶液，取上层澄清液。

1．2 草酸铵 3．5%溶液。

1．3 酚酞指示剂 1%乙醇溶液。

1．4 盐酸 (1+2)溶液。

1．5 冰乙酸。

1．6 氨水 (1+3)溶液。

2．操作步骤

2．1 碳酸盐的鉴定 取试样少许，加盐酸溶液(1．4)后即产生二氧化碳气，通入氢氧化钙溶液(1．1．1)中，即产生白色沉淀。

2．2 钙的鉴定 取上述试液，加酚酞指示液(1．3)，用氨水(1．6)调至中性，加入草酸铵溶液(1．2)即产生白色沉淀，此沉淀能在盐酸溶液(1．4)中溶解，而在冰乙酸(1．5)中不溶解。

取铂丝，用盐酸润湿后在无色火焰中燃烧至无色，蘸取试样再烧，火焰即显砖红色。

(二)碳酸钙含量测定

1．原理

在pH大于12的介质中，用三乙醇胺掩蔽少量的铁(Fe³⁺)、铝(A1³⁺)、锰(Mn²⁺)等离子，以钙试剂为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定钙(Ca²⁺)，过量的乙二胺四乙酸二钠夺取已与指示剂络合的钙(Ca²⁺)，游离出指示剂，根据颜色的变化判断反应的终点。

2．试剂和溶液

2．1 盐酸 6mol／LHCl溶液。

2．2 氯化钠。

2．3 氢氧化钠 10%溶液。

2．4 三乙醇胺 30%水溶液。

2．5 氨水－氯化铵缓冲溶液(pH10)。

2．6 氧化锌 容量基准。

2．7 铬黑T 0．5%溶液。

2．8 钙指示剂 称取10g预先在105～110℃下烘干2h的氯化钠，置于研钵内研细，加入0．1g钙试剂，研细，混匀。

2．9 乙二胺四乙酸二钠 0．02mol／L标准溶液。

3．操作步骤

称取0．6g预先在105～110℃下烘至恒重的试样(称准至0．0002g)，置于烧杯中，用少量水湿润，盖上表面皿，滴加盐酸溶液(2．1)至全部溶解，加50mL水，全部移入250mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。准确移取25mL置于250mL锥形瓶中，加5mL三乙醇胺溶液(2．4)、25mL水、5mL氢氧化钠溶液(2．3)和少量钙指示剂(2．8)，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液(2．9)滴定至溶液由红色变为纯蓝色。

4．分析结果的表述

碳酸钙的质量分数(w)按式(9－17)计算：

式中 V——滴定所消耗乙二胺四乙酸二钠标准溶液的体积，mL

c——乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度，mol／L

m——试样质量，g

0．05——每毫摩CaCO3的质量，g／mmol

5．允许差

平行测定两结果之差不大于0．20%。

十、食品中钙的测定方法

(一)原子吸收分光光度法

1．原理

样品经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收波长422．7nm的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。

2．试剂和溶液

要求使用去离子水，优级纯试剂。

2．1 盐酸。

2．2 硝酸。

2．3 高氯酸。

2．4 混合酸消化液 硝酸与高氯酸比为4∶1。

2．5 0．5mol／L HNO3溶液 量取45mL硝酸，加去离子水并稀释至1000mL。

2．6 2%氧化镧溶液 称取25g氧化镧(纯度大于99．99%)，加75mL盐酸于1000mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度。

2．7 钙标准溶液 精确称取1．2486g碳酸钙(纯度大于99．99%)，加50mL去离子水，加盐酸溶解，移入1000mL容量瓶中，加2%氧化镧稀释至刻度。贮存于聚乙烯瓶内，4℃保存。此溶液每毫升相当于500μg钙。

2．8 钙标准使用液 钙标准使用液的配制见表9－4。钙标准使用液配制后，贮于聚乙烯瓶内，4℃保存。

表9－4 钙标准使用液配制

3．仪器

所用玻璃仪器均以硫酸－重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。

3．1 实验室常用设备。

3．2 原子吸收分光光度计。

4．测定方法

4．1 样品处理。

4．1．1 样品制备：微量元素分析的样品制备过程中应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品，做钙测定的样品不得用石磨研碎。湿样(如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等)用水冲洗干净后，要用去离子水充分洗净。干粉类样品(如面粉、奶粉等)取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。

4．1．2 样品消化：精确称取均匀样品干样0．5～1．5g(湿样2．0～4．0g，饮料等液体样品5．0～10．0g)于250mL高型烧杯，加混合酸消化液20～30mL，上盖表皿。置于电热板或电沙浴上加热消化。如未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加几毫升去离子水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近2～3mL时，取下冷却。用去离子水洗并转移于10mL刻度试管中，加去离子水定容至刻度(测钙时用2%氧化镧溶液稀释定容)。

取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。

4．2 测定 将钙、标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液如表9－5所示，测定操作参数如表9－6所示。

表9－5 不同浓度系列标准稀释液的配制方法

表9－6 测定操作参数

其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等均按使用的仪器说明调至最佳状态。

将消化好的样液、试剂空白液和各元素的标准浓度系列分别导入火焰进行测定。

5．分析结果的表述

5．1 标准曲线法 以各浓度系列标准溶液与对应的吸光度绘制标准曲线。钙标准曲线如图9－4所示，它的线性相关系数为0．9996。

图9－4 钙标准曲线

测定用样品液及试剂空白液由标准曲线查出浓度值(ρ及ρ₀)，再按式(9－18)计算。

式中 x——样品中元素的含量，mg／100g

ρ——测定用样品中元素的浓度(由标准曲线查出)，μg／mL

ρ₀——试剂空白液中元素的浓度(由标准曲线查出)，μg／mL

V——样品定容体积，mL

f——稀释倍数

m——样品质量，g

——折算成每百克样品中元素的含量，mg

5．2 回归方程法 由各元素标准稀释液浓度与对应的吸光度计算出回归方程(也可以输入计算器得出回归方程)，计算见式(9－19)。

ρ=ay+b (9－19)

式中 ρ——测定用样品中元素的浓度(可由计算器直接得出，μg／mL)

a——曲线斜率

y——元素的吸收度

b——曲线的截距

由回归方程或计算器得出测定样液及试剂空白液的浓度后，再由式(9－20)计算。

式中各符号的含义同曲线法说明。

5．3 结果的重复性 同实验室平行测定或连续两次测定结果的重现性钙小于10%。

最低检测限：钙0．1μg。

(二)滴定法(EDTA法)

1．原理

钙与氨羧络合剂能定量地形成金属络合物，其稳定性较钙与指示剂所形成的络合物为强。在适当的pH范围内，以氨羧络合剂EDTA滴定，在达到当量点时，EDTA就自指示剂络合物中夺取钙离子，使溶液呈现游离指示剂的颜色(终点)。根据EDTA络合剂用量，可计算钙的含量。

2．试剂和溶液

要求使用去离子水，优级纯试剂。

2．1 1．25mol／L KOH溶液 精确称取71．13g氢氧化钾，用去离子水稀释至1000mL。

2．2 1%氰化钠溶液 称取1．0g氰化钠，用去离子水稀释至100mL。

2．3 0．05mol／L柠檬酸钠溶液 称取14．7g柠檬酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)，用去离子水稀释至1000mL。

2．4 混合酸消化液 硝酸与高氯酸比为4∶1。

2．5 EDTA溶液 精确称取4．50gEDTA(乙二胺四乙酸二钠)，用去离子水稀释至1000mL，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。使用时稀释10倍即可。

2．6 钙标准溶液 精确称取0．1248g碳酸钙(纯度大于99．99%，105～110℃烘干2h)，加20mL去离子水及3mL0．5mol／LHCl溶液溶解，移入500mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。此溶液每毫升相当于100μg钙。

2．7 钙红指示剂 称取0．1g钙红指示剂(C₂₁O₇N₂SH₁₄)，用去离子水稀释至100mL，溶解后即可使用。贮存于冰箱中可保持一个半月以上。

3．仪器

所有玻璃仪器均以硫酸－重铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。

3．1 实验室常用玻璃仪器高型烧杯(250mL)、微量滴定管(1mL或2mL)、碱式滴定管(50ml)、刻度吸管(0．5～1mL)、试管等。

3．2 电热板 1000～3000W，消化样品用。

4．样品制备

同原子吸收分光光度法。

5．测定方法

5．1 样品消化 同原子吸收分光光度法。

5．2 测定。

5．2．1 标定EDTA浓度：吸取0．5mL钙标准溶液，以EDTA滴定，标定其EDTA的浓度，根据滴定结果计算出每毫升EDTA相当于钙的毫克数，即滴定度(T)。

5．2．2 样品及空白滴定：吸取0．1～0．5mL(根据钙的含量而定)样品消化液及空白于试管中，加1滴氰化钠溶液和0．1mL柠檬酸钠溶液，用滴定管加1．5mL1．25mol／LKOH溶液，加3滴钙红指示剂，立即以稀释10倍EDTA溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。

6．分析结果的表述

样品中该元素的含量按式(9－21)计算：

式中 x——样品中元素含量，mg／100g

T——EDTA滴定度，mg／mL

V——滴定样品时所用EDTA量，mL

V₀——滴定空白时所用EDTA量，mL

f——样品稀释倍数

m——样品称重量，g

7．结果的重复性

同实验室平行测定或连续两次测定结果的重复性小于10%。

本方法的检测范围：5～50μg。

注：作为食品添加剂的钙盐，有氯化钙、柠檬酸钙、甘油磷酸钙、葡萄糖酸钙、酸性焦磷酸钙、氢氧化钙、磷

酸二氢钙、磷酸氢钙、正磷酸钙、碳酸钙、乳酸钙、泛酸钙及硫酸钙，其含量计算如下：

氯化钙量=钙(%)×2．769

柠檬酸钙量=钙(%)×4．745

甘油磷酸钙量=钙(%)×5．243

葡萄糖酸钙量=钙(%)×11．188

酸性焦磷酸钙量=钙(%)×5．390

氢氧化钙量=钙(%)×1．541

磷酸二氢钙量=钙(%)×6．289

磷酸氢钙量=钙(%)×4．294

正磷酸钙量=钙(%)×2．590

碳酸钙量=钙(%)×2．497

乳酸钙量=钙(%)×7．692

泛酸钙量=钙(%)×11．890

硫酸钙量=钙(%)×4．296