香蕉组培脱毒快繁技术

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《果树育苗手册》第329页（1810字）

1．母本园的建立 母本园是由无病毒侵染无病虫害的优良香蕉母株组成，可以是本地选育的良种，也可以引自外地或国外，但都必须经过严格地检疫后，方能植于母本园中。母本园需要有可靠的隔离区，远离病毒源，远离能由蚜虫传播病毒的作物。

2．外植体的选择及灭菌 香蕉组织培养主要选择吸芽作外植体。吸芽是球茎上发生的侧芽，俗称吸芽。吸芽应采自无毒母本园，或采自田间生势旺盛的无病母株。应在早春与秋季干旱季节采芽。避免在梅雨季节或盛夏雨季采芽，因为这时高温高湿，吸芽含杂菌较多。从田间取回的吸芽，先用自来水冲洗干净，再用洗涤剂洗2～3次，剥去外层苞叶，切去基部部分组织，保留长约5～10厘米具顶芽和侧芽原基的小干茎。先于超净工作台上用紫外灯灭菌30～40分钟后，再用0．1%升汞(含0．1%吐温－80)溶液消毒15～20分钟，然后用无菌水冲洗3～4次。

3．吸芽的接种和培养 将灭好菌的吸芽切成大小约1．5厘米³的小块，每块上应带有1～2个芽原基。将材料接种于培养基中，材料不能倒放，基部切口应插入培养基内。培养基可选用：MS+BA1．0～3．0毫克／升+NAA0．2毫克／升+2%～3%蔗糖；MS无机盐+肌醇100毫克／升+盐酸硫胺素0．5毫克／升+盐酸吡哆醇0．5毫克／升+甘氨酸2．0毫克／升+烟酸5．0毫克／升+IBA0．1毫克／升+2%蔗糖。培养温度为25～28℃，培养早期不照光，待芽萌动后每天光照10～12小时，光照强度为2000～3000勒克斯。待长出一定数量的丛生苗，便可供切取茎尖之用。

4．茎尖培养 从培养的丛生芽中选取粗壮、基部膨大的无根苗，于超净工作台上借助显微镜剥取大小约0．5～1．5毫米，带有1～2个叶原基的茎尖。经无菌水洗净后，接至液体培养基内进行振荡培养。待茎尖长至3～5毫米大小时转至固体培养基，注意不能倒置或斜放。培养基可选择：MS无机盐+盐酸硫胺素0．5毫克／升+BA2．0～5．0毫克／升+2%～3%蔗糖；改良KC培养基+CH200毫克+2%蔗糖。培养温度25～28℃，每日光照10～12小时，光照强度1000～2000勒克斯。

5．扩大繁殖及诱导生根 小茎尖接种后，初期为乳白色，一周后转绿。基部逐渐长大形成基盘，并分化出白色球状小突起。经培养2个月左右，逐渐长大成丛生芽。更换1次培养基，芽苗生长加快并形成更多的丛生芽。此时应取样进行血清学检测检查有无病毒，清除带毒苗。

当苗高2～3厘米时，将具有丛生苗的基盘切成若干块，每块带一苗，按上述方法再继代繁殖。为减少组织培养过程中变异株的出现，继代次数以不高于8代为宜，最多也不应超过10代。当继代繁殖至一定量时，可取样进行第二次病毒检查。

诱导生根：从基盘处将小苗切离后，转至生根培养基上诱导生根。常用的诱导生根培养基有：MS+BA1．0毫克／升+NAA5．0毫克／升+3%蔗糖；MS+BA2．0毫克／升+NAA1．0毫克／升+3%蔗糖；MS无机盐+肌醇100毫克／升+盐酸硫胺素0．5毫克／升+盐酸吡哆醇0．5毫克／升+烟酸5．0毫克／升+甘氨酸2．0毫克／升+2%蔗糖；MS+KT0．5毫克／升+NAA0．8毫克／升+IBA0．8毫克／升+3%蔗糖+0．3%活性炭。

6．炼苗及移栽 当小植株高达7～8厘米，具5～7片绿叶时便可移栽，移栽前必须炼苗在每日上午9～11时阳光不太强时，打开瓶盖将三角瓶置于阳光下晒苗2～3天。移栽时，应选择株高6～15厘米，假茎较粗，具5～7片绿叶的植株，弱苗和变异株必须淘汰。将小苗根部的培养基洗净，置于0．1%KMnO₄溶液浸泡1分钟，然后植于营养钵中，并淋透水。每隔1～2天喷雾1次，定期喷施杀蚜虫农药。移苗10天后可喷施0．5%KNO₃肥液，每周2次，20天后可增加肥液浓度，并增施磷钾肥。营养钵应放在保温、保湿并防虫的大棚内，苗场应远离病毒源，附近不得种植黄瓜、茄类、烟草、蔬菜、豆类作物，防止媒介蚜虫传播病毒。