样品的采集
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第26页(2330字)
一、组织、脏器的采集
供作细菌学检验的样品,其大小以5cm3为宜。淋巴结可连同周围脂肪、肾脏可连同被膜、其他器官选择病变明显部位采取.分别置于灭菌容器中。为了保证不污染,每采一个脏器用一套灭菌剪镊,各脏器必须作触片(或压片)数张。
供病毒检验的病料,一般以50%的磷酸甘油(或50%甘油生理盐水)保存。
二、血液、血清的采集
血液,若需抗凝,可吸5%柠檬酸钠1ml于注射器中,取血9~10ml,混匀注入灭菌试管或小瓶中。取血时可顺便涂血片数张。因柠檬酸钠具有微弱灭活病毒的作用,且在接种动物后易引起非特异性反应,因此供病毒检验的血液,最好用肝素(每ml血液加20单位即0.2mg)抗凝。也可用玻璃珠脱纤维蛋白而抗凝。
血清的采取,可将血液采入试管或三角瓶中斜放,使血液自然凝固,再分离血清,气温低时,可放于37℃1h,然后再放冰箱(4℃)过夜,促进血块收缩,使血清析出。
供作血清学试验的被检血清或补体,事前应经56~60℃水浴锅中灭能后再用。为防血清在运送过程中变质,可在其中加入0.01%硫柳汞或0.01%叠氮钠、0.5%石炭酸或青霉素500~l000IU/ml、链霉素500~1000μg/ml等防腐剂。有时需采病初及病后(15~20天)的双份血清,以便进行比较。
三、脓汁及创伤感染样品的采集
脓汁、水疱液、水肿液、渗出液,可用无菌注射器或毛细吸管抽取深部病料。开口化脓灶或鼻腔、阴道分泌物,可用灭菌棉拭蘸浸后放入灭菌试管中。
胆汁,可用消毒注射器吸取,或取整个胆囊置一塑料袋中送检。
四、鼻、咽分泌物的采集
以灭菌棉拭、揩取鼻粘膜上的分泌物置灭菌试管内。采咽分泌物,应先将患畜头部保定,以开口器打开口腔,将无菌棉拭伸入舌根后上方(腭扁桃及咽扁桃部分及咽峡部分)拭取病料后放入无菌试管中。如疑为病毒感染可将棉拭上的分泌物洗入加青、链霉素的肉汤中。
五、痰液的采取
疑为结核病、霉形体病、巴氏杆菌病、波氏杆菌病……等呼吸道传染病时,宜采痰液进行病原分离。平时家畜很难咳嗽,即使有咳,也不易吐痰,因而生前可在喉囊附近作人工诱咳让其将痰咳至咽喉部,用棉拭法采取痰液。死后可解剖开咽喉部、气管、支气管寻找着痰液后用棉拭蘸取。
六、粪便的采集
用清洁玻棒挑新鲜粪便1g左右,或用棉拭伸入直肠内掏取,也可刮取直肠粘膜送检。
七、胃肠内容物的采集
中小家畜可将食道及十二指肠结扎,断端烧烙后用整个胃送检。大家畜胃内容物,以灭菌刀剖开胃后,用灭菌匙取。
肠内容物,可选取适宜肠段7cm以上,两端结扎,以灭菌剪刀从结扎线外端剪断,置玻璃容器或塑料袋中。
八、穿刺液(胸水、腹水、关节液等)的采集
生前可用灭菌注射器带粗长针头刺入胸腔或腹腔最低垂部位抽取胸水或腹水。关节液采取可用人腰椎穿刺针刺入关节腔后抽取,注意无菌操作。
尸体剖检后的胸水、腹水、心包液、关节液,可用灭菌注射器或灭菌吸管采取。
九、尿液的采集
母畜生前可用灭菌导尿管插入阴道尿道口直入膀胱颈人工导尿。公畜可将阴茎末端尿道口及其附近先用0.1%新洁尔灭消毒,然后用灭菌生理盐水冲洗后以无菌脱脂棉(或纱布)拭干,再套一小的灭菌塑料袋(固定绳拴于背腰部)让其排尿后,立即取下送检。
死后的动物,剖开腹部,掀开肠管,用灭菌注射器刺入膀胱抽取尿液。也可将膀胱颈结扎,剪取整个膀胱送检。
十、脑脊液的采集
将家畜保定稳妥,以无菌手术将腰椎穿刺针穿入于蛛网膜下腔(从百会穴即腰椎与荐椎交界处,常称十字部处下针最好),待针头涌出第一滴脑脊液后,立即用注射器衔接好,抽出适量脑脊液。
死后可剖开椎间结合处,用注射器插入椎间孔抽取脑脊液。
十一、饲料样品的采取
青贮料作乳酸菌和腐败菌的检查,取样应采青贮窖塔的不同层次,以无菌操作方法采取有代表性样品20g备用。
发霉饲料欲作霉菌及其毒素测定时,应取有代表性的部分。发霉的谷物粮食往往还带有杂菌,分离真菌之前可用0.1%升汞或1%石炭酸液浸泡样品(粒料)3~5min,再用蒸馏水反复冲洗3~4次以除去消毒剂后,再作真菌分离培养。
十二、水样及病理组织切片样品的采集
自来水采集,须先开龙头放几分钟,再注入灭菌容器内。
河水及其他水的采样,应先将灭菌采样瓶潜入水源10~15cm处,掀开瓶盖,待水盛满后取出。
病理组织切片样品可取1~2cm3放入10%甲醛液中固定。