口蹄疫血清保护试验操作技术

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《动物检疫手册》第28页（1101字）

(一)用已知血清鉴定未知病毒

1．被检病毒液的制备。将送检病料洗净，称重研磨，用生理盐水或pH7．6的磷酸盐缓冲盐水作1∶5－1∶10的悬浮液，在4℃浸出18－24小时，或在室温浸出1－2小时，振荡后以每分钟3000转离心10分钟，其上清液即为被检的病毒液。

2．乳鼠血清注射。用4窝2－3日龄的乳鼠，每窝10只，以一只母鼠哺乳，分别注射已知口蹄疫A、O、C、ZB型血清。每窝注射7只，留3只不注射，作病毒对照。口蹄疫血清作1∶3－1∶5稀释。每只乳鼠皮下注射0．1毫升。

3．接种病毒液(攻毒)。注射血清后6－24小时，接种制备好的被检病毒浸出液。每窝注射过血清的7只乳鼠，给5只接种病毒，留2只作血清健康对照，3只未注射血清的乳鼠，也同时接种病毒，每只皮下0．1毫升。

4．观察与判定。接种病毒后，每天观察2－3次，连续观察5－7天，病毒对照鼠及注射其中3型口蹄疫血清的乳鼠均发病死亡，仅有某型的鼠健活，则病料为该型口蹄疫。

(二)用已知病毒鉴定未知血清

1．被检血清的处理。将被检血清每毫升加青、链霉素各约1000单位，在室温处理1小时。

2．乳鼠注射被检血清。用4窝2－3日龄乳鼠，每窝10只，以一只母鼠哺乳，用处理好被检血清注射乳鼠，每窝注射7只，留3只作病毒对照。每只乳鼠皮下注射0．1毫升。

3．攻已知的病毒。注射血清后6－24小时，用口蹄疫A、O、C、ZB型已知病毒进行接种，每一型病毒接种一窝乳鼠，每窝注射过血清的7只乳鼠中，分别给5只接种病毒，留2只作血清健康对照。未注射血清的3只乳鼠也同时接种病毒。接种的各个病毒液作10^-2－10^-3稀释(约10000LD₅₀)，每只乳鼠皮下注射0．1毫升。

4．观察与判定。攻毒后，观察6－7天，每天观察2－3次。如果攻某型病毒的乳鼠被保护，血清对照乳鼠均健活，而该型的病毒对照鼠及攻其他型口蹄疫病毒的乳鼠均发病死亡，则被检血清为该型口蹄疫血清。注意在用已知血清鉴定未知病毒过程中，送检病料在第一代不发病或发病不好时，要连传下去，得有一定死亡数目才能用此法。