芝麻籽粒、植株和土壤中残留量检测方法(方法一)
出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第555页（3089字）
北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 陈家梅 戴荣彩 夏福利 王漫琳
样本中精喹禾灵母体用石油醚提取；代谢物用二氯甲烷提取。液-液分配和中性氧化铝柱层析净化，气相色谱法(ECD)和液相色谱法(UV)测定。
1．主要仪器及设备
气相色谱仪 电子捕获检测器(ECI))
液相色谱仪 紫外检测器(UV)
玻璃层析柱 12mm i．d．×280mm
2．主要试剂
丙酮、乙酸乙酯、石油醚、甲醇、乙腈、磷酸、盐酸、乙酸、无水硫酸钠、中性氧化铝、弗罗里硅土
精喹禾灵标准品、精喹禾灵酸(代谢物)标准品
3．检测步骤
3．1 提取
3．1．1 精喹禾灵母体的提取
称取10．0g芝麻样本(植株10．0g、土壤20．0g)于250mL具塞三角瓶中，加入100mL丙酮，振荡提取1h，抽滤。用50mL丙酮／石油醚(1∶1，V／V)洗涤滤渣。
3．1．2 代谢物精喹禾灵酸的提取
称取芝麻样本10．0g(土壤20．0g)于250mL具塞三角瓶中，加入80mL甲醇／丙酮(6∶2，V／V)和20mL1．5mol／L盐酸溶液，振荡提取1h，抽滤。用20mL提取剂洗涤滤渣。
3．2 净化
3．2．1 液-液分配
3．2．1．1 精喹禾灵母体
合并滤液，转入500mL分液漏斗中，加入200mL2%硫酸钠溶液，用50mL、40mL、30mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水后用旋转蒸发器(40℃水浴)浓缩至2mL左右，待柱层析净化。
3．2．1．2 代谢物精喹禾灵酸
合并滤液，转入500mL分液漏斗中，加入200mL2%硫酸钠溶液，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后用旋转蒸发器(40℃水浴)浓缩至2mL左右，待柱层析净化。
3．2．2 柱层析净化
3．2．2．1 精喹禾灵母体
在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，用10mL7%乙酸乙酯／石油醚预淋。转入样本浓缩液后用70mL15%乙酸乙酯石油醚溶液洗脱。收集全部洗脱液，浓缩至干。用石油醚定容(芝麻、植株2mL，土壤1mL)，待测。
3．2．2．2 代谢物精喹禾灵酸
在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、3g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，用20mL甲醇预淋。将浓缩液转入柱内，用10mL甲醇分两次洗涤浓缩瓶后转入柱内并淋洗，弃去。用60mL37%乙酸／二氯甲烷／甲醇(1∶50∶50，V／V／V)，洗脱并全部收集。浓缩至干，用乙腈定容至2mL，待测。
3．3 色谱法测定
3．3．1 气相色谱法(精喹禾灵母体的测定)
检测器 ECD
色谱柱 3mmi．d．×2m玻璃柱，4%OV-101／Chromosorb WHP，80～100目
检测温度 柱温270℃，进样口300℃，检测器310℃
载气 高纯氮，2kg／cm2
进样量 2μL
保留时间 4．5min
3．3．2 液相色谱条件(代谢物精喹禾灵酸的测定)
检测器 UV
波长 238 nm
色谱柱 双柱ODS150mm×4．6mm×5μm；ODS250mm×4．6mm×5μm
柱温 室温
进样量 20μL
流动相与梯度洗脱程序如下：
4．结果计算
外标(峰高)-标准曲线法定量
5．灵敏度、准确度和精确度
最小检出量 精喹禾灵4×10－11g，精喹禾灵酸4×10－10g。
最低检测浓度 精喹禾灵：芝麻籽粒、植株0．004mg／kg，土壤0．001mg／kg；
精喹禾灵酸：芝麻籽粒、植株0．004mg／kg，土壤0．002mg／kg。
回收率 芝麻籽粒、植株和土壤中添加精喹禾灵0．02～2．00mg／kg时，平均回收率分别为94．0%～98．3%、94．8%～97．8%和98．6%；芝麻籽粒和土壤中添加精喹禾灵酸0．05～2．00mg／kg时，平均回收率分别为95．2%～101．8%和91．5%～98．0%。见表3-34-1。
相对标准偏差 1．1%～7．3%，见表3-34-1。
表3-34-1 芝麻籽粒、植株和土壤中精喹禾灵、精喹禾灵酸添加回收率及相对标准偏差实验结果
6．芝麻、植株和土壤中精喹禾灵气相色谱、精喹禾灵酸液相色谱测定谱图
见图3-34-1。
图3-34-1 芝麻、植株和土壤中精喹禾灵气相色谱，精喹禾灵酸液相色谱测定谱图