金色葡萄球菌的检查

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第216页（1464字）

一、样品采集

1．病畜材料 可采取畜禽的脓汁、渗出液、血液、关节液、乳汁等。

2．食品卫生材料 主要是肉、乳、蛋等及其制品，亦可取剩余食物。为了便于操作，对大批量食品的采样，可按制品的千分之一量抽检。取抽样10g加入到90ml的缓冲葡萄糖肉汤中培养，进行分离检查。

二、涂片镜检

用采集的样品或培养物直接涂片，染色镜检，见有革兰氏阳性球菌，大小均匀，数量众多，呈不规团块(似葡萄串)或有散在排列时，可作“疑有葡萄球菌”的判断，特别是脓汁、炎症材料的涂片似一纯培养时，往下做。

三、分离培养

简便而常用的营养琼脂平板、血琼脂平板、营养肉汤、7．5%氯化钠营养肉汤等。却普曼(Chapman)平板具选择性，但不是常备的培养基。

金色葡萄球菌在普通的营养肉汤中生长迅速，37℃下18h内呈均匀浑浊，培养时间过长会有均匀沉淀，摇之即散。平板上可形成2mm左右直径的菌落，光滑潮润，边缘整齐，圆形凸起而不透明，有脂溶性色素，使菌落呈现金黄色或柠檬色、白色。血琼脂上现溶血毒素，在菌落周围形成溶血环。

四、生理生化特点

1．凝固酶试验 为鉴定金黄色葡萄球菌很重要依据。有玻片法及试管法，见六章四节十四项。

玻片法快速简便，多用于常规检验，但可能出现假阳性，故常以试管法为准。

犬的菌株不凝固人血浆，人和其他动物菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。牛和羊的血浆通常只能被动物来源的菌株所凝集。天竺鼠的血浆不能应用。

2．生化试验 金色葡萄球菌分解蔗糖、麦芽糖、d-甘露醇、d-甘露糖、d-蕈糖、α-乳糖、d-半乳糖、β-d-果糖、d-核糖等产酸，而不能使d-木(胶)糖、1-伯胶糖、d-纤维双糖、d-岩藻糖(fucoseC₅H₁₁O₄CHO)、棉实糖、水杨苷等产酸，V．P．阳性，还原硝酸盐，产生碱性磷酸酶，微弱地分解尿素，每ml含新生素(novobiocin)1．6μg时不能生长。

3．肠毒素试验 金色葡萄球菌约有一半产生不同型的肠毒素，从牛乳房炎中分到的金色葡萄球菌27%产肠毒素，可致人的食物中毒，并使实验动物出现症状或致死。试验方法乃将待检菌接营养肉汤，在10%CO₂环境下培养于37℃5天，置100℃水浴中30min杀菌并破坏其他毒素，离心取上清备用。将此上清按1m1／100g体重的剂量，腹腔注射6～8周龄体重250～550g吃食不久的幼猫，或口服10～15ml亦可，同时以无菌肉汤对另外的幼猫作对照。对照无反应，实验猫在15～120min内发生呕吐、腹泻、寒战、发热甚或死亡者，为肠毒素试验阳性。

由于肠毒素与凝固酶二试验极为相关(＞90%)，后者易于操作，故只在食品卫生检验的需要时，才做肠毒素试验。

检定有毒力的金色葡萄球菌的基本点是：革兰氏阳性葡萄串状排列的球菌，兼性厌氧，需氧或厌氧情况下均能发酵甘露醇产酸，凝固酶阳性，在被检材料中众多。