(1)黄瓜和土壤中残留量检测方法(方法一)

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第246页（2183字）

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 韩步兴 郑德荣

样本用乙酸乙酯或甲醇提取，Si柱、SPE-C₁₈柱净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

电动搅拌器

pH计

超声波发生器

旋转蒸发器

2．主要试剂

甲醇、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、乙腈、无水硫酸钠

SPE-C₁₈柱 Sep-Pak

缓冲溶液 2．07g磷酸二氢钾溶于300ml双蒸水，用磷酸调至pH=2．65

霜脲氰标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 黄瓜

称取25g样本于250mL三角瓶中，加入60mL、50mL乙酸乙酯，搅拌提取，每次10min，抽滤。滤渣再用20mL乙酸乙酯洗涤。合并滤液转移入250mL分液漏斗中，静置分层。将下层水相放入另一50mL分液漏斗内并加10mL乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯相移入250mL的分液漏斗中，摇匀后取1／2，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器浓缩至干。

3．1．2 土壤

称取20g土壤于300mL三角瓶中，加60mL、50mL甲醇，搅拌提取10min抽滤。用20mL甲醇冲洗滤渣，合并滤液浓缩至近干。

3．2 净化

3．2．1 黄瓜样本层析柱净化

在层析柱底部加入少许脱脂棉并依次加入2cm无水硫酸钠、2g硅胶、0．2g助滤剂／活性碳(5∶1，W／W)和2cm无水硫酸钠。用15mL甲醇／二氯甲烷(4∶1，V／V)混合淋洗液预淋层析柱。用少量淋洗液将样本浓缩物移入层析柱中，用40mL淋洗液洗脱，收集洗脱液浓缩至近干，待C₁₈柱净化。

3．2．2 土壤样本液-液分配

将土壤的浓缩液提取物加40mL双蒸水在超声波水浴中充分溶解，转入分液漏斗中加入石油醚振荡，静置分层后弃去石油醚，收集水层待C₁₈柱净化。

3．2．3 SPE-C18柱净化

SPE-C₁₈柱使用前先用10mL乙腈，再用10mL乙腈预淋洗，弃去预淋液。将收集的土壤水相和黄瓜样本的浓缩淋洗物用40mL双蒸水超声波溶解，分别经过滤纸过滤于小分液漏斗中，再滴入接有针管、抽滤瓶的C₁₈柱中。用10mL双蒸水淋洗，弃去。用10mL乙腈洗脱，收集乙腈淋洗液，用旋转蒸发器浓缩至干，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV(SPD-1)

波长 254 nm

色谱柱 ZorbaxODS 250mm×4．6mm

流动相 乙腈／缓冲液(28∶72，V／V)

流速 0．8mL／min

柱温 35℃

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－9g。

最低检测浓度 黄瓜0．015mg／kg，土壤0．01mg／kg。

回收率 黄瓜与土壤中添加霜脲氰0．067～1．68mg／kg时，平均回收率分别为80．6%～86．0%和83．8%～96．2%。见表2-5-1。

相对标准偏差 0．3%～10．9%，见表2-5-1。

表2-5-1 黄瓜和土壤中霜脲氰添加回收率及相对标准偏差实验结果